心筋ミトコンドリアDNAによる年齢推定

使用心脏线粒体 DNA 估计年龄

• 批准号: 08770320
• 负责人: 福井 謙二
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770320/
• 关键词: 心筋ミトコンドリアDNA; 年齢

心筋ミトコンドリア(mt)DNAにみられる,特定領域の欠失の有無と年齢との関係を検索した.材料:当教室の法医剖検例のうち,生後1ヶ月から91歳で各年齢層に広く分布している55例の心筋組織を材料とし,定法に従いプロテイナーゼK/フェノール・クロロホルム法でDNAを抽出した.心筋mtDNAの欠失の検索:PCR法によって代表的な二領域の欠失を検索した:1.ATPase6とDループ領域間の7,436bpの欠失の存在について,1,002bpの増幅産物が得られるようにプライマーを設定した.一方,COI領域中の1,030bpをターゲットとしてpositive controlの増幅とした.2.ATPase8とND5間の4,977bpの欠失の存在について,242bpの増幅産物が得られるようにプライマーを設定した.一方,欠失領域を含んだ324bpをターゲットとしてpositive controlの増幅とした.positive controlの増幅が認められることを前提として,欠失領域の増幅の有無によって欠失の有無を判定した.結果:1.年齢と心筋mtDNA欠失の有無について,両欠失ともに欠失存在群が欠失非存在群に比して,年齢が有意に高かった.2.欠失の存在する最低年齢は7,436bpの欠失で27歳,4,977bpの欠失で29歳であった.また,欠失の非存在の最高年齢は7,436bpの欠失で48歳,4,977bpの欠失で47歳であった.今回検索した二領域の欠失はほとんど,同時に出現していたが,一致しないものも数例認められた.3.放射性同位元素標識のプライマーを用い,増幅サイクル数10から40回で増幅後,各サイクル数の増幅産物の比活性から鋳型DNAの欠失/正常比を検量したが再現性に問題があり,現在方法の改良を試みている.4.今後,前記3.の方法に加え,competitive PCR法による検量を行う予定である.

心sujiミトコンドリア(mt)DNAにみられる, a specific field of absence and absence.齢との情を検SOした.Materials:のうち of the forensic autopsy in the classroom, 1 month after birth. 91 years old. Distribution of layers in different years. Materials and methods of cardiac muscle tissue of 55 cases. Heart of the heart The link between mtDNA and mtDNA: The link between the two fields represented by the PCR method: 1. The link between the ATPase6 and D link areas is 7,436bp.ついて,1,002bp のamplified product が得られるようにプライマーをSET した.One side, 1,030bp をターゲットとしてpositive in the COI field The control width is increased. 2.ATPase8 and ND5 are 4, 977bp is missing, and 242bp is missing. The product of the product is the setting of the product. The area of the loss is the positive. 324bp of the positive controlのincreasing widthとした.positive Controlのincreasing width がcognitionめられることをpremise として, the owed loss field のincreasing width の有无 によって owed loss の有无をdeterminationした.Results: 1. Nian 齢と心畷の有无について,両无码ともに无existent group が无码不existent groupにThan して, the age is high and the age is intentional. 2. The existence of the loss is the minimum age of 7,436bp and the loss is 27 years old, 4,9 77bpの无码で29峳であった.また, owed loss of non-existence the highest age 7,436bpの无码で48years old,4 ,977bpの无码で47歳であった. This time I am asking for the second domain of 検検たの无码はほとんど, and at the same time I appeared していたが, 3. Radioactive isotopic element identification のプライマーを Use い, increase the サイクル number 10かAfter 40 cycles of amplification, the specific activity of each amplified product and the loss of normal DNA-type DNA/the reproducibility of the normal specific amount of the amplified product were determinedにquestionがあり, the current method is improved and tried みている.4. From now on, preface 3.のmethodにplusえ, competitive The PCR method is easy to measure and predetermined.