パーキンソン病遺伝子治療の基礎的研究

帕金森病基因治疗基础研究

• 批准号: 08770455
• 负责人: 守口 篤
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770455/
• 关键词: 遺伝子導入; HVJ-リポソーム法; 小脳顆粒細胞; グリア細胞; 肝細胞増殖因子; ドーパミン受容体

ニューロン、グリアへの遺伝子導入によるパーキンソン病治療の基礎的検討神経細胞あるいはその周囲に存在するグリア細胞への有効な遺伝子導入法が確立されれば、難治性の中枢神経疾患の治療への道が開けると考えられる。我々はセンダイウイルスの細胞融合能を利用したHVJーリポソーム法により、ラット小脳顆粒細胞(初代培養神経細胞)の細胞核内にアンチセンスオリゴヌクレオチドやβ-galactosidase遺伝子を高効率での導入に成功し、しかも長期にわたって発現させることができた。また生体においてもマイクロインジェクション法とHVJ-リポソーム法の併用でラット脳内に遺伝子を導入し、その産物の4週間以上にわたる機能発現を確認した。さらに、現在進行中の実験として、強力な神経再生因子としての作用を有する肝細胞増殖因子(HGF)、及びドーパミン受容体(D2)遺伝子を培養小脳顆粒細胞、培養ヒトアストロサイトに導入することで、長期のドーパミン産生とその作用の安定性を検討している。具体的には、CMWプロモーターを持つプラスミドベクターに挿入したHGF及びドーパミン受容体(D2)遺伝子を初代培養神経細胞にHVJ-リポソーム法を用いて導入し、mRNAレベルでの遺伝子発現をノーザンブロッティング法およびRT-PCR法にて経時的に確認している。また産物の活性測定についても検討を行っている。本研究では遺伝子治療の基礎的検討を行っているが、今後パーキンソン病の発症機構の詳細が解明されれば、さらに有効な根治的遺伝子治療が可能であると考えられる。その際、本研究で得られた知見が大いに役立つと考えられる。

ニ ュ ー ロ ン, グ リ ア へ の posthumous son 伝 import に よ る パ ー キ ン ソ ン の basis of treatment of beg god 検 経 cells あ る い は そ の weeks 囲 に exist す る グ リ ア cells へ の is sharper な posthumous son 伝 が import method to establish さ れ れ ば, difficultly の central god の 経 disease treatment へ の way が open け る と exam え ら れ る. I 々 は セ ン ダ イ ウ イ ル ス の cell fusion to be able to use a し を た HVJ ー リ ポ ソ ー ム method に よ り, ラ ッ ト small 脳 granulosa cells (early training resting to restore energy 経 cells) の nuclei に ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド や beta - galactosidase heritage 伝 son を high working rate で の import に successful し, し か も long-term に わ た っ て 発 now Youdaoplaceholder0 とがで た た. ま た raw body に お い て も マ イ ク ロ イ ン ジ ェ ク シ ョ ン method と HVJ - リ ポ ソ ー の ム method using で ラ ッ ト 脳 within に heritage 伝 を import し, そ の の products more than 4 weeks between に わ た る function 発 を now confirmed し た. さ ら に, now underway の be 験 と し て, powerful な god 経 regeneration factor と し て を の is す る factor (HGF), liver cells raised colonization and び ド ー パ ミ ン by let body (D2) posthumous son 伝 を cultivation small 脳 granulosa cells, ヒ ト ア ス ト ロ サ イ ト に import す る こ と で, long-term の ド ー パ ミ ン produce と そ の role の stability を beg し 検 て い Youdaoplaceholder0. Specific に は, said プ ロ モ ー タ ー を hold つ プ ラ ス ミ ド ベ ク タ ー に scions into し た HGF and び ド ー パ ミ ン by let body (D2) heritage 伝 early を trainees resting to restore energy 経 cells に HVJ - リ ポ ソ ー を ム method with い て import し, mRNA レ ベ ル で の posthumous son 伝 発 now を ノ ー ザ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ method お よ び rt-pcr method に て 経 The に at that time confirms that て る る る. Determination of <s:1> activity of また products に る て て 検 検 for を steps って る る. This study で は heritage 伝 son treatment of の foundation 検 を line っ て い る が, future パ ー キ ン ソ ン disease の 発 disease agency の detailed が interpret さ れ れ ば, さ ら に have sharper な effect a radical cure the legacy of 伝 son が treatment can で あ る と exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0 そ At that time, the で of this study obtained られた insights が the が of the に of the office of the に of the office of the office of the と of the えられる.

项目成果

Aoki M.et al.: "Survival of grafts of genetically modified cardiac myocytes transfected with FITC-labelled oligodeoxynucleotides and β-galactosidase gene in non-infarcted area,but not myocardial infarcted area." Gene Therapy. 4. 120-127 (1997)

Aoki M. 等人：“用 FITC 标记的寡脱氧核苷酸和 β-半乳糖苷酶基因转染的转基因心肌细胞在非梗塞区域的存活率，但在心肌梗塞区域则不然。基因治疗。” ）

Nakamura Y.et al.: "Hepatocyte growth factor (HGF) ia a novel member of endothelium-specific growth factors : additive stimulatory effect of HGF with basic fibroblast growth factor,but not vascular endothelial growth factor." Journal of Hypertension. 14.

Nakamura Y.等人：“肝细胞生长因子（HGF）是内皮特异性生长因子的新成员：HGF 与碱性成纤维细胞生长因子（但不是血管内皮生长因子）具有附加刺激作用。”

Morishita R.et al.: "Potential role of endothelium-specific growth factor,hepatocyte growth factor,on endothelial damage in diabetes mellitus." Diabetes. 46. 138-142 (1997)

Morishita R.等人：“内皮特异性生长因子、肝细胞生长因子对糖尿病内皮损伤的潜在作用。”