糖尿病状態におけるGIP受容体の発現調節および機能の解析

糖尿病患者 GIP 受体表达调控和功能分析

• 批准号: 08770816
• 负责人: 安田 浩一朗
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770816/
• 关键词: 糖尿病; GIP; GIP受容体; 遺伝子変異; インスリン分泌

糖尿病モデルであるGKラットおよびその正常対照であるWisterラットより、膵ランゲルハンス島(ラ氏島)を単離し、Total RNAを抽出した。特異的オリゴヌクレチドを用いてRT-PCR法にてGIP受容体遺伝子発現量を定量した。また単離ラ氏島を用いてバッチインキュベーション法にてGIPに対するインスリン分泌を測定し、RIA法にて細胞内cAMP濃度を、蛍光指示薬であるfura2を用いて細胞内カルシウム濃度を測定した。以上の検討により、糖尿病群ではGIP刺激に対するインスリン分泌が著明に低下していることが明らかになった。GIP受容体遺伝子発現量および細胞内cAMP産生には有意の差は認められなかった。しかし細胞内カルシウム上昇反応は、糖尿病群で著明に低下していた。この結果より、糖尿病状態におけるGIP刺激によるインスリン分泌の障害は、cAMP産生以後で細胞内カルシウム上昇に至るまでの部位に存在することが示唆された。またヒトGIP受容体遺伝子の異常を検討する目的にて糖尿病患者の白血球よりゲノムDNAを抽出し、PCR-SSCP法にて遺伝子変異をスクリーニングした。さらに得られた異常遺伝子の核酸配列を決定した。この結果GIP受容体遺伝子のエクソン7(Gly198Cys)とエクソン12(Glu354Gln)にアミノ酸の置換を伴う点変異を発見した。この2種の異常遺伝子の生理活性をGIP刺激に対するcAMP産生を測定することにより検討した。この結果エクソン12の変更には有意な活性の低下は見られなかったが、エクソン7の変更では、cAMP産生の有意な低下が見られ糖尿病との関連が考えられた。

Diabetes mellitus, GK, diabetes, GK, diabetes, diabetes The special RT-PCR method was used to determine the quantity of the GIP receptor. The GIP method was used to determine the level of secretion, the RIA method was used to determine the degree of intracellular cAMP, and the light indicator was used to determine the level of intracellular cAMP. The above information about diabetes, diabetes mellitus, GIP stimulation, diabetes, diabetes. The GIP receptacle was measured and the intracellular cAMP production was intentionally measured. There are signs of anti-diabetes and low levels of diabetes in the cytosol. Results: the results showed that there was a disturbance of secretion in patients with diabetes mellitus, which was stimulated by GIP, and that there was an abstinence in the parts of the cell after the birth of cAMP. Objective to treat diabetic patients with white blood cells (WBC), white blood cells (WBC), DNA aspiration (DNA), and PCR-SSCP methods. I don't know how to determine the number of nucleic acids in the nucleic acid column. The results showed that the GIP acceptor gene was not present in 7 (Gly198Cys) cells, 12 (Glu354Gln) cells, and was associated with the presence of acidosis. The physiological activity of two kinds of oysters was measured by GIP stimulation and cAMP test. The results showed that the activity of diabetes mellitus was significantly lower than that of normal controls. The results showed that the activity of diabetes mellitus was lower than that of normal controls. The results showed that the activity of diabetes mellitus was lower than that of normal controls. The results showed that the activity of diabetes mellitus was lower than that of normal controls. The results showed that the activity of diabetes was significantly lower than that of normal controls. The results showed that the activity of diabetes was significantly lower than that of cAMP.

项目成果

Akira Kubota: "Identification of two missense mutation in the GIP receptor gene:a functional study and association analysis with NIDDM" DIABETES. 45. 1701-1705 (1996)

Akira Kubota：“GIP 受体基因中两个错义突变的鉴定：功能研究及其与 NIDDM 糖尿病的关联分析”。