アストロサイトに発現するbFGF isoformの機能解析に関する研究

星形胶质细胞表达的bFGF亚型的功能分析研究

• 批准号: 08771087
• 负责人: 島崎 賢仁
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771087/
• 关键词: アストロサイト; サイトカイン; bFGF; アイソフォーム

ラット(Wistar albino)新生仔の海馬を摘出し、アストロサイトの初代培養系を作成した。2回継代後、2.5%fetal calf serum添加minimun essential mediumにて培養し、IL-lb(50U/ml),TNF-a(100ng/ml).EGF(100ng/ml),IL-ib(50U/ml)+TNF-a(100ng/ml)にて24時間刺激した後、アストロサイト細胞抽出液を作成した。現在、得られた抽出液よりヘパリンカラムを用いたbFGFの回収と、ゲル濾過、イオン交換樹脂、ヘパリンカラムを用いた各々のisoformへの分離と、さらに、ラット(Wistar albino)胎仔(E-16)由来の中隔野コリン作動性神経細胞、脳幹部コリン作動性運動神経細胞、中脳黒質ドパミン神経細胞、脊髄運動神経細胞の培養系を作成し、各々のisoformを添加し、2〜7日後の細胞数、choline asetyltransferase(ChAT)活性、およびdopamine uptakeを指標として、各々のisoformのもつ各種神経細胞の分化・生存維持におよぼす効果を検討中である。また、C6 glioma cell lineおよびschwanomma cell line RN22に各々のisoformを添加し、その細胞増殖速度、H^3-thymidine uptake、MIB-1 labeling indexを指標として、各々のisoformの腫瘍増殖におよぼす影響を検討中である。

The primary culture system of Wistar albino was established. 2. After subculture, 2.5% fetal calf serum was added with minimal essential medium for culture, IL-lb(50U/ml),TNF-a(100 ng/ml), EGF(100 ng/ml),IL-ib(50U/ml)+TNF-a(100ng/ml) for 24 days. Now, the extraction solution can be separated from each other by filtration, exchange resin, isoform, etc.(Wistar albino) fetal (E-16) derived septal neurokinesis, neurokinesis culture system establishment, isoform addition, cell count, choline asetyltransferase(ChAT) activity, dopamine uptake Each isoform is responsible for the differentiation and maintenance of various neurons. The effects of isoform addition, cell growth rate, H^3-thymidine uptake and MIB-1 labeling index on cell proliferation in C6 glioma cell line RN22 and schwanoma cell line RN22 were discussed.

项目成果

上口裕之、吉田一成、島崎賢仁ら:"培養アストロサイトにおけるbFGF isoformの発現パターンおよび細胞内局在におよぼすサイトカインの影響" 神経細胞の成長・再生・移植. 8. 15-16 (1996)

Hiroyuki Kamiguchi、Kazunari Yoshida、Kenji Shimazaki 等人：“细胞因子对培养的星形胶质细胞中 bFGF 亚型的表达模式和亚细胞定位的影响”《神经元生长、再生和移植》(1996)。

Kamiguchi H., Yoshida K., Shimazaki K., et al.:"Cytokine-induced selective increase of high molecular weight-bFGF isoforms and their subcellular Kinetics in cultured rat hippocampal astrocytes." Society of Neuroscience Abstracts. 22. 549 (1996)

Kamiguchi H.、Yoshida K.、Shimazaki K.等人：“培养的大鼠海马星形胶质细胞中细胞因子诱导的高分子量 bFGF 亚型及其亚细胞动力学的选择性增加。”