HMG-CoA還元酵素阻害剤の腎癌細胞増殖抑制における作用機序とアポトーシス誘導

HMG-CoA还原酶抑制剂抑制肾癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用机制

• 批准号: 08771277
• 负责人: 橋本 紳一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771277/
• 关键词: シンバスタチン; アポトーシス

HMG-CoA還元酵素阻害剤によるヒト腎細胞癌の増殖抑制における作用機序をアポトーシスの面から検討するために当教室で保有しているヒト腎癌細胞株(KU-2,VMRC,Caki-1)を用いて、以下の3点について検討した。1.細胞形態の観察各細胞株のsingle cell suspension2×10^5cell/mlを調整し、シンバスタチンの濃度は、以前のAlamar Blueアッセイで得られたIC_<50>より、5μg/mlの濃度で添加し、72時間後に位相差顕微鏡により観察した。500個の細胞を観察したところ、アポトーシス小体を形成した細胞は72%に認められた。2.DNAの電気泳動細胞形態観察と同様にシンバスタチン5μg/mlで各細胞株に添加し、72時間後に各細胞株(1.5×10^6細胞)よりDNAを抽出し、アガロースゲル電気泳動法にて検討した。いずれの細胞株においても約200bpのラダーが検出された。3.フローサイトメトリーによる検討シンバスタチン添加をしなかった各細胞株と、同様にシンバスタチン5μg/mlで72時間処理した各細胞株(1.5×10^6細胞)を、冷エタノールにて4℃で6時間固定後、RNase Aで37℃、30分インキュベートし、PI染色を施行した。これらの細胞をBecton-Dikinson社のフローサイトメーターを用いて検討した。アポトーシス細胞はシンバスタチン処理により、KU-2では10.5%から52.3%に、VMRCでは12.7%から44.3%に,Caki-1では14.1%から60.3%に増加した。以上より、ヒト腎癌細胞にHMG-CoA還元酵素阻害剤(シンバスタチン)を5μg/mlで作用させるとアポトーシスが起こることが確認された。

HMG-CoA enzyme inhibits the proliferation of cell carcinoma and inhibits the proliferation of cell carcinoma. The sequence of action is that the cell line of cancer cell line (KU-2,VMRC,Caki-1) is kept in the classroom, and the following three o'clock is true. 1. Cell morphology analysis shows that the cell lines of each cell line single cell suspension2 × 10 ^ 5 cell