生体内における蓚酸カルシウム結晶付着の研究

草酸钙晶体体内附着的研究

• 批准号: 08771296
• 负责人: 山手 貴詔
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771296/
• 关键词: Calcium oxalate crystal; Madin-Darby canine lidney cell; Osteopontin

(目的)私達はMadine Datby Canine Kidney(M.D.C.K)細胞表面への蓚酸カルシウム(CaOx)結晶沈着がosteopontin(OPN)添加で増加する事を報告した。この沈着へのOPN関与をOPNを抑制した状態で確認したため報告する。(対象と方法)2x10^6cellのM.D.C.K細胞をconfluentまで培養後OPN特異的抗原抑制のためhuman OPN polyclonal抗体、OPNを切断するThrombin、OPN細胞表面のreceptor阻止のためcyclic Arg-Gly-Asp(R.G.D.)peptides、N-acetylglucosamine合成阻害にTunicamysinを加え各々24時間培養、その後OPNの発現程度を蛍光抗体法で、CaOx結晶沈着程度、細胞内OPN量をアイソトープで測定した。(結果)OPN発現程度はコントロール群に比べ全群抑制された。CaOx沈着は抗体投与群で80%以上、Thrombin群で60〜90%、cyclic R.G.D群で60〜90%、Tunicamysin群で50〜60%抑制された。細胞内OPN量はR.G.D,Tunicamysin,Thrombin群で減少していた。(考察)種々の方法によりOPN分泌を抑制する事により結晶沈着が減少した事から、M.D.C.K細胞へのCaOx結晶沈着の主因となる細胞外マトリックスがOPNであることがわかった。

Objective To report the increase of osteopontin(OPN) addition on the surface of Madine Datby Canine Kidney(M.D.C.K) cells. OPN status is confirmed. 2x10^6 cell M.D.C.K cells confluent in culture OPN-specific antigen inhibition by human OPN polyclonal antibody, OPN cleavage by Thrombin, OPN cell surface receptor inhibition by cyclic Arg-Gly-Asp(R.G.D.) The inhibition of peptides and N-acetylglucosamine synthesis by Tunicamysin was determined by light antibody method after 24 hours of incubation, CaOx crystallization and intracellular OPN content. (Results)OPN occurrence was higher than total group suppression. The CaOx antigen was inhibited by more than 80% in the antibody-administered group, 60 ~ 90% in the Thrombin group, 60 ~ 90% in the cyclic R.G. D group, and 50 ~ 60% in the Tunicamysin group. Intracellular OPN levels were decreased by R.G.D,Tunicamysin,Thrombin groups. (Investigation) Methods for the inhibition of OPN secretion and the main cause of CaOx crystallization in M.D.C.K cells.

项目成果

TAKENORI YAMATE: "The effect of Osteopontin on the adhesion of calcium oxalate crystals to Madin-Darby Canine lidney cells" European Urology. 30. 388-393 (1996)

TAKENORI YAMATE：“骨桥蛋白对草酸钙晶体与 Madin-Darby 犬睑细胞粘附的影响”欧洲泌尿学。