生体内における蓚酸カルシウム結晶付着の研究

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(目的)私達はMadine Datby Canine Kidney(M.D.C.K)細胞表面への蓚酸カルシウム(CaOx)結晶沈着がosteopontin(OPN)添加で増加する事を報告した。この沈着へのOPN関与をOPNを抑制した状態で確認したため報告する。(対象と方法)2x10^6cellのM.D.C.K細胞をconfluentまで培養後OPN特異的抗原抑制のためhuman OPN polyclonal抗体、OPNを切断するThrombin、OPN細胞表面のreceptor阻止のためcyclic Arg-Gly-Asp(R.G.D.)peptides、N-acetylglucosamine合成阻害にTunicamysinを加え各々24時間培養、その後OPNの発現程度を蛍光抗体法で、CaOx結晶沈着程度、細胞内OPN量をアイソトープで測定した。(結果)OPN発現程度はコントロール群に比べ全群抑制された。CaOx沈着は抗体投与群で80%以上、Thrombin群で60〜90%、cyclic R.G.D群で60〜90%、Tunicamysin群で50〜60%抑制された。細胞内OPN量はR.G.D,Tunicamysin,Thrombin群で減少していた。(考察)種々の方法によりOPN分泌を抑制する事により結晶沈着が減少した事から、M.D.C.K細胞へのCaOx結晶沈着の主因となる細胞外マトリックスがOPNであることがわかった。