ヒト卵胞液中の黄体化ホルモン結合抑制因子の検討

人卵泡液中黄体生成素结合抑制剂的研究

• 批准号: 08771350
• 负责人: 粉川 信義
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771350/
• 关键词: 黄体化ホルモン(LH); ヒト卵胞液; 黄体化ホルモン結合抑制因子; LH受容体; 非ステロイド性卵巣内機能調節因子; ゴナドトロピン結合抑制因子

体外受精・胚移植施行症例より得た卵胞液を用いて、ヒト卵胞液中の黄体化ホルモン結合抑制因子(luteinizing hormone binding inhibitor : LHBI)について検討した。ヒト卵胞液を10.000rpmで遠沈し残渣を除いた後、残留分子量500および10.000のフィルターを用いて限外濾過、脱塩した。得られたヒト卵胞液低分子量分画(MW 500-10.000)を酢酸アンモニウムをelusion bufferとしてMono Qカラムによる陰イオン交換し画分化した。画分化されたサンプルについて、^<125>I-hLHのヒトLH受容体結合に対する効果をRadio ligand receptor assay (RRA)にて比較検討すると、Mono Qカラム非吸着分画(MQ-TO)に^<125>I-hLHの受容体結合を阻害する活性(LHBI活性)が回収された。以下、MQ-TO分画の生物活性について検討した。RRA法での検討では、MQ-TOは^<125>I-hLHのヒトLH受容体分画に対する結合を用量依存的に阻害した。ヒトLH受容体分画は95%O_2, 5%CO_2環境下で37C, 18hr培養するとhLH刺激により用量依存的にcAMPを産生したが、MQ-TOを同時添加するとhLH刺激下のcAMP産生は有意に抑制された。また、成熟マウス精巣間質細胞を用いたin vitro bioassayではovineLH刺激下に95%O_2, 5%CO_2環境下で34C, 3hr培養すると成熟マウス精巣間質細胞は用量依存的にcAMP, testosteroneを産生したが、MQ-TO同時添加によりovineLH刺激下のcAMP, testosterone産生は有意に抑制された。以上より、ヒト卵胞液中にLHBI活性分画が存在し、LHの受容体結合を調節し、LHにより誘導されるステロイド産生を修飾することで生物活性を発現している可能性が示唆された。

In vitro fertilization, embryo transplantation cases implemented a よ り must た follicle liquid を with い て, ヒ ト follicle fluid in の luteinizing ホ ル モ ン combined inhibitory factor (luteinizing hormone binding inhibitor: LHBI) に つ い て beg し 検 た. ヒ ト follicle fluid を 10.000 RPM で far shen し residue を except い た, residual molecular weight after 500 お よ び 10.000 の フ ィ ル タ ー を with い て limit filtration, take off the salt し た. Have ら れ た ヒ ト follicle fluid of low molecular weight points draw (500-10.000 MW) を boggy acid ア ン モ ニ ウ ム を elusion buffer と し て Mono Q カ ラ ム に よ る Yin イ オ ン exchange し painting differentiation し た. Painting differentiation さ れ た サ ン プ ル に つ い て, ^ < 125 > I - hLH の ヒ ト LH by let body combined with に す seaborne る unseen fruit を Radio ligand receptor assay (rras) are kept に て compare beg す 検 る と, Mono Q カ ラ ム non smoking a painting (MQ - TO) に ^ < 125 > I - hLH の hurt let body combined with を resistance す る activity (LHBI activity) が back 収 さ れ た. The following is a discussion on the <s:1> biological activity of the MQ-TO subplot に に に て検 て検 て検 て検. Beg で RRA method で の 検 は, MQ - TO は ^ < 125 > I - hLH の ヒ ト LH is let body points paint に す seaborne る combining を dosage dependent に resistance against し た. ヒ ト LH by body painting は 95% O_2, 5% CO_2 environment で 37 c, 18 hr training す る と hLH stimulus に よ り dosage dependent に cAMP を produce し た が, MQ - TO を also add す る と hLH stimuli の cAMP は intentionally に an adverse さ れ た. ま た, mature マ ウ ス extract を 巣 stroma cells in い た in vitro bioassay で は ovineLH stimuli に O_2, 95% 5% CO_2 environment で 34 c, 3 hr training す る と mature マ ウ ス fine 巣 mesenchymal cells は dosage dependent に cAMP, testosteroneを produces たが. When MQ-TO is simultaneously stimulated by によ ovineLH to stimulate cAMP, the production of testosterone たが intentionally に inhibits された. Above よ り, ヒ ト follicle fluid in に LHBI active points draw が し, LH の let body combined with を adjust し, LH に よ り induced さ れ る ス テ ロ イ ド produce を modified す る こ と で bioactive を 発 now し て い が る possibility in stopping さ れ た.