子宮頚部病変生検組織由来の細胞株における子宮頚癌多段階発症機構の解析

宫颈病变活检组织细胞系宫颈癌多阶段发展机制分析

• 批准号: 08771337
• 负责人: 横山 正俊
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771337/
• 关键词: 子宮頚癌多段階発症機構; HPV; P16

1.子宮頚部異形成上皮、子宮頚部初期病変の生検組織からの細胞株の樹立産婦人科外来において、軽度異形成3例、中等度異形成4例、高度異形成4例、上皮内癌3例の計14例の生検組織を採取し、それぞれを処理後、培養を開始した。うち、12サンプルについては、初代培養に成功し、継代5代目まで、培養することができた。しかし、いずれもそのあと、senescenceを迎え、数ヵ月にわたって培養液の交換を続けたが、その後増殖を続ける細胞は、現在まで得られていない。これまでに、数例のみ異形成上皮からの不死化細胞株の樹立の報告はあるが、そのほとんどは、HPVの遺伝子がインテグレートされている。また、これまでの報告では、異形成においては、HPV遺伝子はエピゾ-マルの状態にあることが知られている。これらのことより、異形成からの不死化細胞株の樹立には、かなり厳しいセクションが必要なことが推察され、より多数の症例からの試みが必要と思われ、現在それを継続中である。2.HPV-DNA導入によって得られた細胞株における検討生検組織からの不死化細胞株が得られていないため、我々がすでに得ていたHPV-DNA導入不死化細胞株、またそのtumorigenic cell lineにおいて、tumor supressor gene P16(MTS1)の発現、点突然変異の有無についてNorthern blotting, Western blotting、 PCR-SSCPを施行した。その結果、不死化後、P16の発現の亢進が認められたが、悪性形質転換の前後で変化は認められなかった。また、点突然変異は認めなかった。これらのことより、P16は不死化前癌病変から悪性形質転換の過程においては、特に重要な働きはしていないことが示唆された。

1. In the early stage of uterine heteroplasia, 3 cases of heteroplasia, 4 cases of moderate heteroplasia, 4 cases of high heteroplasia, 3 cases of intraepithelial carcinoma, and 14 cases of cell lines were established. 12 generations, primary culture, fifth generation, culture The cells were cultured for several months, and the cells were cultured for several months. In this case, several cases of heterotrophic epithelialization and the establishment of immortalized cell lines were reported. The HPV gene was detected in the report. The establishment of immortal cell lines is necessary for the investigation of most of the disease cases. 2. Northern blotting, Western blotting, PCR-SSCP were performed on HPV-DNA introduced immortalized cell lines, tumorigenic cell lines, tumor suppressor gene P16(MTS1), spot mutation, and presence or absence of HPV-DNA. The result, after the death, P16 and the emergence of hyperactivity, the nature of the change before and after the change of recognitionまた、点突然変异は认めなかった。P16 is the most important part of the process of cancer transformation.

项目成果

Y Nakao: "Induction of P16 during immortalization by HPV16 and HPV18 and not during maligent transformation" British Journal of Concer. (in press). (1997)

Y Nakao：“在 HPV16 和 HPV18 永生化过程中诱导 P16，而不是在恶性转化过程中诱导”《英国健康杂志》。