硝子体中に存在する細胞増殖阻止因子のクローニング

玻璃体内细胞生长抑制因子的克隆

• 批准号: 08771475
• 负责人: 片井 直達
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771475/
• 关键词: 増殖硝子体網膜症; 増殖因子; 増殖阻止因子; 硝子体

ブタ眼硝子体には増殖因子または増殖阻止因子が存在するかを明らかにするため以下の予備実験を行った。ブタ眼硝子体を18G needle付き注射筒によりホモジナイズした後、フィルター濾過により分子量3kD以下、10kD以下、30kD以下と50kD以下に分画した。10%FBS添加MEM培地下で32well培養皿に培養した豚眼網膜色素上皮細胞(RPE)にこの分画をそれぞれ100μl加え、3日間培養後MMT assayによりRPEの増殖効率を測定した。3kD以下の分画にRPEの増殖阻止活性のあることが判明した。また、30kD-10kD、50kD-30kDの分画にはRPEの増殖活性があることが判明した。ブタ眼硝子体にはRPEに対する増殖因子と増殖阻止因子の両者が混在することが明らかになった。上記予備実験に基づきHPLCにより50kD-30kDの分画をさらに細かく分画して上記同様のassayを行ったところ、35kD付近に最高の増殖活性があることを突き止めた。3kD以下の分画を更にHPLCにより分画しこちらも上記同様のassayを行ったが、現在までに増殖阻止因子の分離はできていない。35kD付近の増殖因子に関しては、既知の増殖因子と比較検討し、抗体での吸収実験を進める予定である。

The growth inhibition factor is present in the growth inhibition factor. 18G needle syringe for nitrates, filtration, molecular weight below 3kD, below 10kD, below 30 kD, below 50 kD The proliferation rate of retinal pigment epithelium (RPE) cells cultured in 32-well dishes with 10% FBS added to MEM was measured by MMT assay after 100μl and 3 days of culture. The growth inhibition activity of RPE below 3kD was determined. The growth activity of RPE in the range of 30kD-10kD and 50kD-30kD was determined. The growth factor and the growth inhibitor are mixed together. The highest growth activity was observed in the 50kD-30kD HPLC assay. The highest growth activity was observed in the 35kD assay. HPLC analysis of samples below 3kD is performed on the same assay, and the PCR assay is performed on the same assay. 35kD related growth factors, known growth factors, comparative studies, antibody uptake, and identification

项目成果

Naomichi Katai: "CHARGE association with congenital glaucoma due to maldevelopment of the antorior chamber angle" Acta Ophthalmologica. (in press).

Naomichi Katai：“由于前房角发育不良，CHARGE 与先天性青光眼相关”《眼科学报》。