トランスウエルチャンバーを用いた小児固形腫瘍新生血管の機能的構造解析

使用 Transwell 小室对儿科实体瘤新生血管进行功能结构分析

• 批准号: 08771554
• 负责人: 吉澤 穣治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771554/
• 关键词: 神経芽腫; 転移; 腫瘍血管; 血管新生

【目的】神経芽腫における腫瘍血管内皮細胞の構造を内皮細胞の間隙の開裂という現象から捕らえ、かつ、この現象を客観的に評価すること。【方法】1)神経芽腫血管細胞を採取して、これを継代培養する。2)Trans well 2槽型カルチャー・チャンバー上に腫瘍血管内皮細胞層を形成する。3)腫瘍細胞をラベリングしてチャンバー上層に入れ、血管内皮細胞層を通過して下層に浸潤した細胞数を定量する。【結果】1)マウス神経芽腫細胞(C1300)4X10^5個をA/Jマウス皮下に移植し、移植後14日目に腫瘍血管を無菌操作で採取した。またヌードマウス可移植性神経芽腫細胞NB-1・GOTO細胞をそれぞれヌードマウス皮下に移植して約1カ月後に腫瘍血管を採取した。これらの腫瘍血管細胞をトリプシン処理後、37℃、20%FCS MEN培養液で継代培養をした。また。コントロールとしてマウス脳末梢血管内皮細胞(MBE)、ヒト肝末梢血管内皮細胞(HSE)を培養した。2)Trans well 2槽型カルチャー・チャンバーのMatrigel上にこれらの腫瘍血管内皮細胞層を形成した。【まとめ】本年度は方法の2)の段階まで成功した。今後の研究は方法3)の段階に移り、腫瘍細胞を〔^<125>I〕Iodo-2 deoxyuridineでラベリングし、これをチャンバー上槽に入れ、浸潤してきた腫瘍細胞数を定量化する予定である。さらにチャンバー内の培養液に抗腫瘍薬等を添加した際の変化を検討したい。

【 objective 】 god 経 buds swell に お け る swollen sores の の tectonic を endothelial cells of vascular endothelium cell gap の cracking と い う phenomenon か ら catching ら え, か つ, こ の phenomenon を guest 観 に review 価 す る こ と. 【 Method 】1) Neural spatula vascular cells を were cultured by て and れを継 subculture する. 2) The vascular endothelial cell layer of the に abscess on the Trans well 2 slot type カ チャ チャ チャ · チャ バ バ する forms する. 3) swollen sores cells を ラ ベ リ ン グ し て チ ャ ン バ ー を upper に into れ, vascular endothelial cell layer by し て lower に infiltrating し た cell number を quantitative す る. 【 Result 】1) ウス ウス 4 × 10^5 をA/J を ウス subcutaneous に transplantation を 14 days after transplantation に abscess vessels を aseptic operation で taken た. ま た ヌ ー ド マ ウ ス portability god 経 buds swell cells NB - 1 · GOTO を そ れ ぞ れ ヌ ー ド マ ウ ス subcutaneous に transplantation し て カ about 1 month after に swollen sores vascular を take し た. <s:1> れら <s:1> the vascular cells of the abscess were treated with をトリプシ <e:1> and then cultured at 37 ° c in 20%FCS MEN culture medium で継 for を を た た た. Youdaoplaceholder0. Youdaoplaceholder0 て トロ トロ トロ と と <s:1> て ウス脳 ウス脳 peripheral vascular endothelial cells (MBE), ヒト hepatic peripheral vascular endothelial cells (HSE)を culture of た. 2) Trans well type 2 slot カ ル チ ャ ー · チ ャ ン バ ー の on Matrigel に こ れ ら の swollen sores endothelial cell layer を form し た. 【まとめ】 for this year, the <s:1> method <s:1> 2) <s:1> stage まで is successful and た is achieved. Future research は の way 3) の Duan Jie に move り, swollen sores を cells (^ < 125 > I) Iodo - 2 deoxyuridine で ラ ベ リ ン グ し, こ れ を チ ャ ン バ ー slot に into れ, infiltrating し て き た swollen sores cell number を quantitative す る designated で あ る. Youdaoplaceholder0, バ, バ, <s:1> in the <s:1> culture medium に, anti-swelling drugs, etc. を, <s:1> た international <s:1> changes を検, た, た, バ.