象牙質・歯髄複合体構成細胞におけるgap junction構成タンパク質の発現

构成牙本质-牙髓复合体的细胞中间隙连接构成蛋白的表达

• 批准号: 08771587
• 负责人: 村松 敬
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771587/
• 关键词: Gap junction; Connexin; Dentin; Pulp complex

本研究の目的はラット歯牙の象牙質・歯髄複合体においてgap Junction構成蛋白質であるconnexinの局在を蛍光抗体法、免疫電顕法で、connexinのmRNA発現をin situ hybridization法で観察し、象牙質・歯髄複合体におけるgap junctionの意義を考察することにある。ラット歯牙の象牙質・歯髄複合体においてgap junction構成蛋白質であるconnexinの局在は、Pineroら(1994)やKagayamaら(1995)が新生児ラットの歯胚を用いて、象牙芽細胞層にconnexin43の局在を未固定凍結切片を使い、蛍光抗体法で検索しているが、成獣レベルでの検索は固定や脱灰により抗原性が失われるため、皆無であった。平成8年度、報告者は成ラットの象牙質・歯髄複合体を1%paraformaldehyde-0.1M phospate bufferによる固定、10%EDTA(7%sucrose加)により脱灰し、成ラット象牙質・歯髄複合体を蛍光抗体法、免疫電顕法(pre-embedding法)でconnexin43の局在を検索したところ、蛍光抗体法では象牙芽細胞層にconnexin43の局在を確認したが、歯髄では局在を認めなかった。また免疫電顕法では象牙芽細胞間に存在するgap junctionに陽性を示す金コロイド粒子を確認した。これらのことよりconnexin43は象牙芽細胞の機能発現に関与している可能性が示唆された。また上記の固定、脱灰では抗原性を保持し、かつ組織学的構造を損なわないことも明らかとなった。以上の結果を第38回歯科基礎医学会(横須賀)で発表した。現在、in situ hybridizationによりconnexin43のmRNAの検索を行っているところである。

The purpose of this study was to investigate the role of gap junction in dentin dentin complex by using photoantibody, immunoelectrochemistry, and situ hybridization methods. The gap junction of dentin and dentin complex of tooth is composed of protein, connexin and protein. Pinero (1994) and Kagayama (1995) are used in the embryonic stage of newborn tooth. The connexin43 of ivory bud cell layer is used in the frozen section of unfixed tooth. The light antibody method is used to detect the protein. The protein is fixed and deashed. In 2008, the reporter confirmed the presence of connexin 43 in ivory bud cell layer by photoantibody method and immunoelectrophotography (pre-embedding method). The presence of gap junctions between ivory bud cells was confirmed by immunoelectrophotography. Connexin43 is related to the functional development of ivory bud cells. The antigenicity is preserved, and the histological structure is damaged. The above results were announced by the 38th Association of Basic Dental Medicine (Yokosuka). Now, in situ hybridization, connexin43 mRNA is detected.