ブタ32kDaエナメリン結合糖鎖の結合部位による糖鎖の多様性

聚糖的多样性取决于猪 32kDa 釉质连接聚糖的结合位点

• 批准号: 08771628
• 负责人: 山越 康雄
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771628/
• 关键词: ブタ幼若エメナル質; ブタ32kDaエナメリン; アスパラギン結合型糖鎖

1.固体別・歯種別糖鎖分析12匹のブタの永久大臼歯及び永久切歯歯胚から固体別及び歯種別に集められた幼若エナメル質から抽出され、逆相HPLCによって精製された32kDaエナメリンについてグリコペプチダーゼFを用いて糖鎖を遊離させ、PA化を行い、糖鎖分析を行った結果、既に判明している32kDaエナメリンに結合しているN型糖鎖のHPLCによる溶出パターンと同様に、全ての試料から8種類の糖鎖が検出された。これら糖鎖については、固体間及び歯種間でバイアンテナ型とトリアンテナ型の糖鎖の比に有意差が見られた。2.糖鎖結合部位糖鎖分析30匹以上のブタの永久大臼歯歯胚から上記方法で精製された32kDaエナメリンにV8プロテアーゼとプロナーゼを作用させ、逆相HPLCを行うことによって、糖鎖結合部位を1箇所ずつ含む3つの糖ペプチドが得られた。これらについて上記方法で糖鎖の遊離及びPA化を行い、糖鎖分析を行った結果、^<72>Asn及び^<79>Asnの結合部位からはそれぞれ5種類と2種類のバイアンテナ型のPA化糖鎖が、また^<91>Asnの結合部位からは3種類のトリアンテナ型のPA化糖鎖が検出された。さらにシアリダーゼ処理の結果、それぞれの糖鎖は共通のアシアロコア構造を有していることが判明した。また、各糖ペプチドの糖鎖あたりの結合シアル酸数は^<79>Asnに結合している糖鎖において著しく減少していた。以上のことより、糖鎖の多様性は歯種による違い、または個体差で生じるのではなく、3箇所の糖鎖結合部位に結合している糖鎖のシアル酸の結合様式と結合位置の違いによって生じることが判明した。また、シアル酸の分解は、3箇所の糖鎖で均一に行われていないことが示唆された。この脱シアル化が幼若エナメル質中に存在するかも知れないシアリダーゼによるものかどうかを解明することが今後の課題となる。

1. Solid-state differential sugar analysis of 12 samples of permanent molluscs and permanent cut embryos. Solid and different sets of solid and different samples were collected and analyzed. The results of the extraction and reverse phase HPLC analysis were used to determine the temperature, temperature, etc., and the results of sugar analysis, PA, sugar analysis, and so on. It is determined that the concentration of 32kDa is the same as that of N-type HPLC and the same as that of the whole material. There is an intentional difference in the concentration of sugar between solids and solids, between solids and in the air. two。 Analysis of glucose in the binding site of glucose in more than 30 animals. The method was used to determine the effect of 32kDa on the embryo of permanent acetabulum, the effect on V8, the reverse phase of HPLC, the concentration of glucose in the part 1, and the content of glucose in the part 1. The method of this method is to compare the results of the PA analysis line, the results of the sugar analysis line, the results of the ^ & lt;72>Asn and the combination of the ^ & lt;72>Asn and the combination of the ^ & lt;79>Asn and the other parts of the combination of the PA and the combination of the PA and the PA. In this paper, the results of the analysis, the results, the results and the results were analyzed. All kinds of sugar, acid, acid The combination of the above-mentioned sugar, sugar-rich, sugar-rich, sugar The contents of sugar, acid, and sugar are all in the same order. In order to solve the problem in the future, it is necessary to know that there is a problem in the future.

项目成果

Y.Yamakoshi et.al: "Sites of asparagine-linked oligosaccharides in porcine 32kDa enamelin" Tooth Enamel VI. (in press).

Y.Yamakoshi 等人：“猪 32kDa 牙釉质中天冬酰胺连接的寡糖的位点”牙釉质 VI。