細胞表面ポリラクトサミン糖鎖の細胞除去マーカーとしての役割

细胞表面聚乳糖胺糖链作为细胞去除标记的作用

• 批准号: 08772113
• 负责人: 安藤 堅
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772113/
• 关键词: アポトーシス; anti-band3IgG; ポリラクトサミン糖鎖

筆者は、老廃細胞の生体による除去機構に関する研究において、血漿中に存在する赤血球膜糖タンパク質band3に対する自然抗体anti-band3IgGが老化赤血球表面のポリラクトサミン糖鎖に結合することを見いだしている。この糖鎖は白血球や種々の培養細胞にも存在しており、老化やアポトーシスを起こした体細胞の除去マーカーとして機能している可能性がある。そこで、ポリラクトサミン糖鎖を持つ細胞としてヒト前骨髄性白血病細胞HL-60cellを用いて、以下の検討を行った。HL-60cellにcycloheximideやactinomycinDを添加し、FCS添加RPMI培地中で最大6時間反応させてアポトーシスを誘導した。アポトーシスの判定はDNAの断片化をアガロース電気泳動法で観察することによって行った。誘導剤を添加しない場合でも断片化がみられたが、誘導剤を添加した場合ではよく断片化がおきており反応6時間で顕著であった。Anti-band3IgGは正常なヒト血清より精製し、^<125>Iで標識後、アポトーシス細胞と2時間反応させた後、細胞に結合した放射活性を測定してanti-band3IgGの結合量を算出した。誘導剤無添加の場合でもanti-band3IgGは結合し、その結合量は反応時間に依存して増加した。誘導剤を添加した場合でも経時的なanti-band3IgGの結合増加がみられ、反応6時間ではその結合量は誘導剤無添加の場合よりも明らかに多かった。この結果から、anti-band3IgGがアポトーシス細胞を認識することがわかった。Anti-band3IgGは細胞表面のポリラクトサミン糖鎖に対する抗体であることから、細胞がアポトーシスをおこす過程で細胞膜にanti-band3IgGの結合をひきおこすような変化がおきており、ポリラクトサミン糖鎖は広く細胞一般の除去マーカーとして機能している可能性があることが示唆された。現在、anti-band3IgGのポリラクトサミン糖鎖に対する結合性を確認中であり、より詳細な知見の得られることが期待できる。

The author studies the mechanism of the removal of aging cells in vivo, band the presence of natural antibodies anti-band3IgG in plasma, which band to the surface of aging red blood cells. The sugar chain is present in cultured cells of leukocytes, and the aging process is likely to start in somatic cells. The following discussion was conducted on the use of HL-60 cells, which are pre-leukemia cells. HL-60 cells with cycloheximide and actinomycin D added, FCS added RPMI culture medium, maximum 6-time response time DNA fragmentation was detected by electrokinetic method. In the case of induction, fragmentation occurs, and in the case of induction, fragmentation occurs. Anti-band3IgG was purified from <125>normal serum, labeled, and conjugated to cells. The amount of anti-band3IgG bound to cells was determined. In the absence of induction agent, anti-band3IgG binding increased with time. The binding of anti-band3IgG increased when the induction agent was added, and the binding amount increased when the induction agent was not added. The result is that the anti-band3IgG is recognized by the cells. Anti-band 3 IgG binding to cell membrane in the process of cell surface separation and glycosidation Now, we are looking forward to confirming the binding properties of anti-band3IgG to the policlinux sugar lock and obtaining detailed insights.