イソプレノイドの生合成系におけるイソペンテニル一リン酸の代謝について

异戊烯基单磷酸在类异戊二烯生物合成系统中的代谢

• 批准号: 08780535
• 负责人: 遠藤 孝恵
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780535/
• 关键词: イソプレノイド; イソペンテニル一リン酸; プレニルトランスフェラーゼ; ジメチルアリル二リン酸; ゲラニル二リン酸

イソペンテニル一リン酸を代謝するかまたは、それを原料としてイソプレノイドを生合成している生物を探し出すことを目的とし、^<14>Cでラベルしたイソペンテニル一リン酸を基質として、以下の2種類の酵素反応を行った。生成物をTLCで分析し、放射性化合物がどのように変化するかを追求した。大腸菌の粗酵素抽出液を、Mg^<2+>イオンの存在下[1-^<14>C]イソペンテニル一リン酸とインキュベーションし、プレニルトランスフェラーゼアッセイを行った。^<14>Cでラベルされた反応生成物を順相シリカゲルTLC(1-プロパノール:アンモニア:水=6:3:1)で分析した結果、基質であるイソペンテニル一リン酸のみが検出され、他に放射能活性なスポットは検出できなかった。このイソペンテニル一リン酸の放射能量が時間の経過と共に減少することから、非特異的なホスファターゼの働きでイソペンテニルアルコールが生成したものと推測される。また同様の方法で、プライマー基質としてジメチルアリル二リン酸又はゲラニル二リン酸を加えて、鎖延長反応が起こるかどうかを調べたところ、鎖延長反応は起こらなかった。大腸菌の粗酵素抽出液に、Mg^<2+>イオン、Mn^<2+>イオン存在下[1-^<14>C]イソペンテニル一リン酸と,リン酸基供給源としてATP、GTP、CTP、TTPとを組み合わせてホスホキナーゼアッセイを行った。^<14>Cでラベルされた反応生成物を上記と同様に分析したところ、基質であるイソペンテニル一リン酸のみが検出され、酵素によるリン酸化は確認できなかった。

The <14>following two kinds of enzymes are used in the metabolism of organic acids. Product TLC analysis, radioactive compounds and chemical analysis In the presence of [1-^ C], Mg^&lt;2+&gt;, the crude enzyme extract of Escherichia coli was prepared<14>. <14>C. The analytical results of TLC(1-prorogroup: water =6:3:1) for the reaction products, matrix analysis and other radioactivity analysis. The radiation energy of this compound decreases with time, and the radiation energy of this compound decreases with time, and the radiation energy of this compound decreases with time. The same method is used to adjust the temperature and temperature of the reaction mixture, and the reaction mixture is added to the reaction mixture. In the presence of E. coli crude enzyme extract, Mg^&lt;2+&gt;, Mn^&lt;2+&gt;,[1-^<14>C], the acid group supplier is composed of ATP, GTP, CTP and TTP. <14>C. The reaction product is recorded and analyzed in the same way as the substrate.