神経細胞におけるPaxillinのチロシンリン酸化とその分子機構

私たちはこれまでに、神経栄養因子(NGF)の情報伝達系に、srcファミリーチロシンキナーゼの基質と考えられているPaxillin、及びp130^<cas>のチロシンリン酸化が関与することを明らかにした。この結果から神経細胞の生長にsrcファミリーが関与すると考えた。本研究では、Paxillinをチロシンリン酸化する経路を中心に解析を行った。1、Paxillinをリン酸化するキナーゼの検出と同定私たちはPaxillinをリン酸化するキナーゼをPC12細胞、及び脳の抽出液中に見いだし、その同定を試みた結果、pp60c-src、cdk2、cdk4、rskほかのキナーゼがpaxillinをリン酸化することを明らかにした。また、pp60^<c-src>がEGF等によって活性化することを見いだした。2、Paxillinと結合する蛋白質の同定GST-Paxillin融合蛋白質を用い、cdk2とcdk4がPaxillinと結合する可能性のあることが示唆する結果を得た。3、Paxilinの脳における局在ラット脳の切片を免疫組織化学的に染色し、Paxillinがあらゆる神経細胞に存在すること、またアストロサイトに非常に多いことを見いだした。以上の結果から、NGFがチロシンキナーゼpp60c-srcを活性化することによって、パキシリンやp130^<cas>のチロシンリン酸化を引き起こすこと、また、他のいくつかのセリン・スレオニンキナーゼがパキシリンをリン酸化することが明らかとなった。

私たちはこれまでに、神経栄養因子(NGF)の情報伝達系に、srcファミリーチロシンキナーゼの基質と考えられているPaxillin、及びp130^<cas>のチロシンリン酸化が関与することを明らかにした。この結果から神経細胞の生長にsrcファミリーが関与すると考えた。本研究では、Paxillinをチロシンリン酸化する経路を中心に解析を行った。1、Paxillinをリン酸化するキナーゼの検出と同定私たちはPaxillinをリン酸化するキナーゼをPC12細胞、及び脳の抽出液中に見いだし、その同定を試みた結果、pp60c-src、cdk2、cdk4、rskほかのキナーゼがpaxillinをリン酸化することを明らかにした。また、pp60^<c-src>がEGF等によって活性化することを見いだした。2、Paxillinと結合する蛋白質の同定GST-Paxillin融合蛋白質を用い、cdk2とcdk4がPaxillinと結合する可能性のあることが示唆する結果を得た。3、Paxilinの脳における局在ラット脳の切片を免疫組織化学的に染色し、Paxillinがあらゆる神経細胞に存在すること、またアストロサイトに非常に多いことを見いだした。以上の結果から、NGFがチロシンキナーゼpp60c-srcを活性化することによって、パキシリンやp130^<cas>のチロシンリン酸化を引き起こすこと、また、他のいくつかのセリン・スレオニンキナーゼがパキシリンをリン酸化することが明らかとなった。