神経細胞の活動に伴う細胞骨格系蛋白質のチロシンリン酸化

与神经元活动相关的细胞骨架蛋白的酪氨酸磷酸化

基本信息

批准号：
10780383
负责人：
奥村宣明
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780383/
关键词：
神経細胞チロシンキナーゼ p130cas paxillin bit SHPS-1 神経カルシウム

项目摘要

我々は、神経細胞の活動に伴う蛋白質のチロシンリン酸化を調べることを目的として、まず、ラット大脳皮質より初代培養神経細胞を調製し、ここに、最も主要な興奮性の神経伝達物質であるグルタミン酸を添加し、蛋白質のチロシンリン酸化を一次元及び二次元電気泳動で解析した。その結果、MAPキナーゼの他、アクチンと結合する細胞骨格蛋白質であるパキシリンが強くリン酸化されることが判明した。パキシリンはsrcファミリーチロシンキナーゼによってよくリン酸化されることから、グルタミン酸による神経情報の伝達に、srcファミリーチロシンキナーゼが関与が示唆された。次に、実際の脳における神経細胞の活動について検討するため、明暗条件下で飼育したラットにおいて、暗期に目に光を当て、その後、視神経からの入力を受ける領域のひとつである視床下部視交差上核をサンプリングして、チロシンリン酸化の変化を解析した。その結果、光刺激に応答してBir/SHPS-1と呼ばれる細胞膜貫通型の接着因子様の蛋白質がチロシンリン酸化されることが判明した。また、そのチロシンリン酸化は、通常の明暗周期においては昼に高く夜に低いことが明らかになった。Bitは細胞外ドメインで細胞間マトリクス分子と結合する一方、細胞内ドメインでSH2をもつチロシンホスファターゼであるSHP-2と結合することが知られており、現在グルタミン酸の細胞内情報伝達系路との関連及び、概日リズムの時刻発振の機構との関連について検討を進めている。

为了研究与神经元活性相关的蛋白质的酪氨酸磷酸化，我们首先制备了大鼠脑皮质的原代培养神经元，并添加了谷氨酸，谷氨酸，这是一种最主的兴奋性神经递质，我们对此分析了单位和二维元的蛋白质蛋白质磷酸化。结果，发现除了MAP激酶外，与肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Paxillin除了强烈磷酸化。帕西林通常被SRC家族酪氨酸激酶磷酸化，这表明SRC家族酪氨酸激酶参与谷氨酸传播神经信息。接下来，为了检查大脑中神经元的实际活性，在黑暗时期的眼睛中，通过在光照和黑暗条件下饲养的大鼠中的眼睛中的光线在眼睛中闪耀的光线进行分析，然后对下丘脑上丘脑上核进行采样，下丘脑上核核是从光神经中接受输入的区域之一，以分析酪氨酸磷酸化的磷酸化磷酸化。结果，发现一种称为BIR/SHPS-1的跨膜粘附样蛋白是酪氨酸在光刺激的响应中被酪氨酸磷酸化的。还已经表明，在正常的光周期中，白天酪氨酸磷酸化较高，夜晚较低。已知位与细胞外结构域中的细胞间基质分子结合，同时还与细胞内结构域中SH2的酪氨酸磷酸酶（酪氨酸磷酸酶）结合，目前正在研究以确定谷氨酸与昼夜节律的时间振荡之间的关系。