イネの光応答発現を示す核移行シグナル受容体蛋白質のリガンドの探索

寻找在水稻中表现出光响应性表达的核定位信号受体蛋白的配体

• 批准号: 09740593
• 负责人: 岩崎 俊介
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09740593/
• 关键词: 蛋白質核移行; 核移行シグナル受容体; インポーティンα; 光応答遺伝子発現; 蛋白質間相互作用; イネ

本研究は、イネの負の光応答発現を示す核移行シグナル受容体蛋白質(AD752)に特異的に結合する蛋白質を単離することにより、光応答の制御に関わる可能性のある、未知の核蛋白質を同定することを目的としている。今年度に実施した研究実績の概要は下記のとおりである。1. イネの2種類の核移行シグナル受容体の蛋白質レベルでの発現の解析前年度は、それぞれの蛋白質に対する抗体を用いて、様々な組織由来のイネ粗抽出液についてウエスタンブロットを行ったが、いずれの抗体によっても非特異的だと思われる複数のバンドが検出され、抗体の特異性に問題があると考えられた。今年度は、抗体をアフィニティークロマトグラフィーなどにより精製し、この問題を解決する予定であったが、下記の実験に力を注いだため、新たな進展は得られなかった。2. 負の光応答発現を示す核移行シグナル受容体(AD752)に特異的に結合するイネ蛋白質のcDNAの単離前年度、蛋白質間相互作用を利用したスクリーニング法によって、イネ緑葉由来のcDNAライブラリーから得られたcDNAクローンは逆鎖が翻訳されたアーティファクトであることが判明した。今年度は、黄化葉由来のライブラリーから、新たに約4kbのサイズのcDNAクローンを得た。その部分塩基配列から、マウスの核局在リン酸化蛋白質であるTSP(TPR-containing,SH2-binding phosphoprotein) と相同な蛋白質をコードしている可能性が高いことがわかった。今後は早急に全塩基配列の決定を行い、蛋白質のAD752との結合や光による細胞内局在性の変化などについて調べていく予定である。

In this study, the results show that the combination of nuclear migration protein receptor receptor protein (AD752) specific receptor protein is sensitive, light response controls the possibility of immunoglobulin, and unknown nucleoprotein is identical to receptor receptor (AD752). This year, we will conduct a study on the summary of this year's study. 1. In the previous year, the protein antibody was detected in the previous year, the protein antibody was detected in the previous year, the protein antibody was detected in the previous year, the protein antibody was detected in the previous year, and the tissue was used in the first year. The antibody has specific sexual problems. For the current year, antibodies will be used in this year, and antibodies will be available for this year. This year, antibodies will be available for the current year, and for this year, antibodies will be available for this year. two。 The results showed that the combination of the nuclear transfer receptor (AD752) and the protein (cDNA) in the previous year and the interaction between the proteins were used to determine the quality of the nuclear transfer drug (AD752). In the previous year, the interaction between the protein and the protein was analyzed by the use of the method of screening, the reason and the cause of the analysis. The results show that the cDNA is correct. The reason for this year's yellowing and yellowing is that the 4kb will be successful and the new cDNA will be successful. The nuclear bureau in the acidified protein, protein, TSP (TPR-containing,SH2-binding phosphoprotein), protein, protein. In the future, the whole array will determine the operation, protein AD752 assay combined with photosensitizer, and the intracellular level of the protein will be determined.

项目成果

Iwasaki, T.: "A novel importin α from rice, a component involved in the process of nuclear protein transport." FEBS Letters. 428・3. 259-262 (1998)

Iwasaki, T.：“一种来自水稻的新型输入蛋白 α，一种参与核蛋白转运过程的成分。”428・3 (1998)。

Shoji, K.: "Cloning of a cDNA encoding an importin-α and down-regulation of the gene by light in rice leaves." Gene. 212・2. 279-286 (1998)

Shoji, K.：“编码导入蛋白-α 的 cDNA 的克隆以及光对水稻叶片的下调”，212·2（1998）。