カトレア切り花のACC合成酵素遺伝子についての研究

卡特兰切花ACC合酶基因的研究

• 批准号: 09760021
• 负责人: 山根 健治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Utsunomiya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760021/
• 关键词: エチレン; 老化; ACC酸化酵素; BA; RT-PCR; カトレア; ACC; ACC合成酵素; RT-PCR法

カトレア類切り花に対してBA処理および外生エチレン処理を行い,日持ち,エチレン生成量,ACC含量,ACC合成酵素(ACS)およびACC酸化酵素(ACO)活性の変化と遺伝子発現について検討した。Lc.Dinah×South Esk‘M-8'およびLc.Irene Finny ‘York'切り花へのBA処理により,それぞれ日持ちが約1.6日問および約0.5日間延長された。エチレン処理花に対するBA処理の延命効果は認められなかった。‘M-8'および‘York'切り花のエチレン生成のクライマクテリック上昇が収穫6日後に認められた。‘M-8'および‘York'切り花への外生エチレン処理により,無処理区の約半分の日持ちとなった。‘York'切り花の花弁において,ACS活性は収穫日から3日後にかけて急激に低下した。それに伴い生成されるACCも減少する傾向があった。‘York'切り花において,エチレン生成量とACC酸化酵素活性との間に正の相関が認められた。15種類のプライマーを設計しPCR法の条件を検討した。ACO酵素遺伝子をRT-PCR法で増幅したところ,花弁のmRNAからはセンスプライマー(5'GCHTGYSAVAAYTGGGG)とアンチセンスプライマー(GGVGGMACRTCRAYCCA)の組み合わせによりアガロース電気泳動で予想される580bsのPCR産物が得られた。また,ずい柱のmRNAからはセンスプライマー(GCYCAYACVGAYGCHGG)とアンチセンスプライマー(GCYTCAAAYCTBGGCTC)において予想される400bsのPCR産物が得られた。花弁とずい柱に逆のプライマーの組み合わせではバンドが認められなかった。以上のことから,カトレア切り花ではACO活性が老化と関係しており,ずい柱と花弁に特異的なACO遺伝子が発現し,老化が促進されることが示唆された。

During the process of BA treatment and exogenous treatment,ACC content,ACC synthase (ACS) activity and ACC acidifying enzyme (ACO) activity were detected. Lc.Dinah×South Esk 'M-8' Lc.Irene Finny 'York' The treatment of BA and the extension of life effect are recognized. M-8'' York' M-8'' York'cut York's cut flowers and flowers are in the middle,ACS activity is rapidly reduced after 3 days of harvest. The tendency of ACC to decrease York's cut flower production and ACC acidification enzyme activity are positively correlated. 15 kinds of PCR design conditions are discussed ACO enzyme gene RT-PCR method increased the amplitude of the PCR product, flower gene mRNA expression in the reverse transcription (5'GCHTGYSAVAAYTGGGG) and reverse transcription (GGVGGMACRTCRAYCCA), and the PCR product was obtained at 580bs. A PCR product of 400bs was obtained from the mRNA fragment of the central column (GCYCAYACVGAYGCHGG) and the cDNA fragment (GCYTCAAAYCTBGGCTC). The flowers are in the middle of the column and the flowers are in the middle of the column. ACO activity is related to aging, and specific ACO genes are found in the inner column of flowers, and aging is promoted.