魚類における脳内生物時計の同定と機能解析

鱼类大脑生物钟的鉴定及功能分析

• 批准号: 09760184
• 负责人: 飯郷 雅之
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760184/
• 关键词: 生物時計; サーカディアンリズム; 脳; 視交叉上核; 網膜; 松果体; 自発摂餌; 魚類; メラトニン; メラトニン受容体

1.自発摂餌活動のサーカディアンリズムにおよぼす松果体験去の影響松果体以外の部位に生物時計が存在するかどうか検討するため,松果体除去ニジマスの自発摂餌活動を計測した.その結果,ニジマスは松果体除去の有無にかかわらず,明暗条件下では明期活動型の日周リズムを示し,このリズムは恒明条件下でも自由継続した.よって,ニジマスでは松果体以外の部位に自発摂餌活動を制御する生物時計が存在することが明らかになった.この生物時計は脳内に存在すると予測された.2.魚類における脳内生物時計の存在部位の検索生物時計指標神経ペプチドの脳内分布を免疫組織化学的に検討し,哺乳類の視交叉上核と相同な魚類脳内の神経核同定を試みた.しかしながら,特定の部位が視交叉上核と相同であると断定できるような染色像は得られなかった.また,魚類においても脳内生物時計の光同調に関与する神経路が存在するかどうか検討するため,キンギョの眼球および松果体にトレーサー(バイオサイチン)を注入し,それらの神経投射部位について検討した.その結果,網膜からの神経投射については視蓋に投射する神経路の存在が再確認されたにとどまった.また,松果体からは手綱核付近に投射する神経線維の存在が確認されたが,視床下部に直接投射する神経線維の存在は確認できなかった.3.時計遺伝子cDNAクローニングの試み上述の組織学的な手法を用いても魚類の脳内生物時計の局在を証明するには至らなかったので,新たなアプローチとして生物時計を支配する遺伝子(すなわち時計遺伝子)のcDNAクローニングを試みた.3種のマウスperiod遺伝子(mPerl,mPer2,mPar3)によく保存されているPAS-Bドメイン付近より縮重プライマーを作成し,PCR法によりニジマスperiod遺伝子のcDNAクローニングを現在試みている.

1. When the pineal gland is removed, the biochronology of the parts outside the pineal gland exists in the biochronology. The pineal gland is removed from the pineal gland. The results showed that the pineal gland was removed from the pineal gland, the active cycle was marked in light and shade, and the pineal gland was free in constant light. It is necessary to control the biological time of the pineal gland outside the pineal gland. There is a significant difference in biochronology. 2. The location of biochronometry in mammalian animals refers to the distribution of immunocytochemistry in mammalian animals. Mammalian animals have identical nuclei in the same nucleus. In a specific part of the visual chiasma, the nucleus on the chiasma is the same. It is concluded that the staining image is the same. The biochronometer of this kind of animal exists in the same way as in the mythical pathway. the pineal gland is injected into the pineal gland, and the projection part of the pineal gland is affected. The results show that there is a problem in the network network node projection system. Pineal gland, pineal gland and pineal gland. 3. The cDNA chronograph is used to analyze the methods of the above-mentioned biomedicine. The biochronometer is used to show that the biochronometer is running from the clock to the clock, and the new one is that the cDNA clock dominates the cDNA cycle. There are three kinds of biochronometers (mPerl,mPer2) MPar3) the PCR method is used to save the data from the PAS-B file, and the PCR method is used to save the data from the cDNA file.

项目成果

Mizusawa et al.: "Molecular cloning and charactorization of a cDNA enboding the retinal arylalkylamine N-acetyltrans ferase of the lakulan trent,ancorlynclus mykiss" Zoological Science. 15. 345-351 (1998)

Mizusawa 等人：“包含 lakulan trent,ancorlynclus mykiss 视网膜芳基烷基胺 N-乙酰转移酶的 cDNA 的分子克隆和表征”《动物学科学》。

Iigo M et al: "Characterization guanosine 5'-O-(3-thiotriphosphate)modulation,dailyvariation,and localization of melatonin-binding sites in the catlish (Silms asotus)brain." General and Comparative Endolrinology. 108. 45-55 (1997)

Iigo M 等人：“表征猫科动物 (Silms asotus) 大脑中鸟苷 5-O-(3-硫代三磷酸) 调节、每日变化和褪黑激素结合位点的定位。”

Iigo M et al: "Unusual responses to light and darkness of ocular melatonin in European Seabuss." Neurokeport. 8. 1631-1635 (1997)

Iigo M 等人：“欧洲海上巴士眼部褪黑激素对光明和黑暗的异常反应。”

飯郷雅之: "「生物時計の分子生物学」III.I.メラトニン合成酵素" シュプリンガー・フェアラーク東京(海老原史樹文,深田吉孝編), pp.83-95 (1999)

Masayuki Iigo：“生物钟的分子生物学”III.I.褪黑素合成酶”Springer-Verlag Tokyo（海老原文树和深田喜孝编辑），第 83-95 页（1999 年）

Iigo M et al: "Melatonin binding sites in the goldfish retina" Zoological Science. 14. 601-607 (1997)

Iigo M 等人：“金鱼视网膜中的褪黑激素结合位点”动物学科学。