ニワトリ胚心臓に発現する骨形成因子(BMP)遺伝子の特異抗体作製と蛋白質の発現

鸡胚心脏骨形态发生蛋白（BMP）基因特异性抗体的制备及蛋白表达

• 批准号: 09770017
• 负责人: 山岸 敏之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770017/
• 关键词: 心臓発生; 上皮-間葉系相互作用; BMP2; TGF β3; ニワトリ胚; TGFβ3

申請者はこれまでにニワトリ胚心臓よりBMP(骨形成因子)ファミリー遺伝子を6種類(BMP2、5、6、7、dorsalin-1、新規BMP)単離した。BMP2 mRNAは、流出路(OT)、房室管(AV canal)の心筋細胞にのみ局在し、心内皮細胞、間葉細胞には存在しないことを明らかにした。AV領域の器官培養系においてBMP2に対するantisense oligo DNAを使いBMP2の活性を特異的に阻害したところ。心内皮細胞の形質転換は抑制された。このことは、BMPが房室管領域で起こる心内皮細胞の形質転換にかかわっていることを示唆している。また心内皮細胞に直接BMP2を作用させてみたところ、単独では心内皮細胞の形質転換を誘導しなかった。しかしTGF(形質転換成長因子)-beta3とともに作用させたところ、TGF-beta3の活性を促進し心内皮細胞を間葉細胞へ分化させた。BMP同士の相互作用も考えられることから、BMP7,dorsalin-1の心臓発生過程での局在について調べた。その結果BMP7は、心房および心室の心筋細胞に強く発現し,心内皮細胞、間葉細胞には観察できなかった。一方dorsalin-1は、発現量が低いものの、BMP2と同じように房室管の心筋細胞に発現が観察され、間葉細胞、心内皮細胞には観察されなかった。器官培養系で組み換え体のBMP7をTGF-beta3とともに作用させると、BMP2のときと同様にTGF-beta3の活性を促進した。これらの結果は、心内皮細胞の形質転換にはBMP2とともにBMP7も関係している可能性があることを示している。dorsalin-1の生物活性については現在検討中である。

The applicant responded to this request by identifying six types of BMP(bone formation factor) genes (BMP2, 5, 6, 7, dorsalin-1, new BMP). BMP2 mRNA is present in the outflow pathway (OT), atrioventricular canal (AV canal) and cardiac muscle cells, endothelial cells and mesenchymal cells. AV domain organ culture system contains BMP2 antisense oligo DNA, which specifically inhibits BMP2 activity. Endothelial cell morphological changes are inhibited. The heart endothelial cells are transformed into cells in the atrioventricular tract. BMP-2 directly acts on cardiac endothelial cells, but only induces morphological changes in cardiac endothelial cells. TGF-3 activity promotes differentiation of endothelial cells and mesenchymal cells. The interaction between BMP and dorsalin-1 is investigated in detail. The results showed that BMP7 was strongly expressed in atrial and ventricular tendon cells, and was observed in endothelial and mesenchymal cells. Dorsalin-1 and BMP-2 are detected in the heart muscle cells of atrioventricular ducts, mesenchymal cells and endothelial cells. In organ culture system, TGF-beta3 activity is promoted by BMP7 and BMP2. The result is that the morphological changes in endothelial cells are not possible. dorsalin-1 is biologically active.

项目成果

Yamagishi et al: "Bone morphogenetic protein-2(BMP2)acts symergistically with transforming grw・th factor-β3(TGFβ3)cloring endothelial-mesenchymal transformation in the developing chich heart" Journal of Cellular Physiology. in press.

Yamagishi 等人：“骨形态发生蛋白 2 (BMP2) 与转化生长因子 β3 (TGFβ3) 协同作用，促进发育中心脏的内皮间质转化”，《细胞生理学杂志》正在出版。