脊椎動物のPolycomb Group Geneのクローニングとその機能解析

脊椎动物Polycomb群基因的克隆及其功能分析

• 批准号: 09770019
• 负责人: 小川 元之
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770019/
• 关键词: Polycomb Group Gene; Enhancer of Zeste遺伝子; 脊椎動物; 神経芽細胞腫; Northern分析; 免疫組織化学; Enhancer of zeste 遺伝子; 白血病; cDNAクローニング

申請者は、昨年度の研究実施計画に沿って研究を行い、次の結果を得た。マウス神経芽細胞腫由来の細胞株Neuro-2aは、培養液中に牛胎児血清が含まれていると、未分化な状態となりアメーバ形をとる。また牛胎児血清を除くと、Neuro-2aは突起を伸長し神経細胞様に分化する。これは神経細胞の分化の一つのモデルと考えられる。このモデル系において、マウスE(z)相同遺伝子の発現パターンを、転写及び翻訳の両側面から検索した。Northern分析の結果、未分化なNeuro-2aではマウス E(z)相同遺伝子の転写は、ほとんど認められないが、分化誘導下では転写量が著しく増加した。更に未分化状態と分化状態のNcuro-2aにおいて、免疫組織化学的手法を用いてマウス E(z)相同蛋白質の局在を検索した。その結果、神経細胞様に分化したNeuro-2aでは、細胞質、特に突起の基始部及び核に陽性反応が見られ、また未分化なアメーバ様のNeuro-2aでは、細胞質の辺縁に弱い陽性反応が検出された。この実験結果から、マウス E(z)相同蛋白質は神経細胞の分化に関与する可能性が示唆された。マウスE(z)相同遺伝子の成体における組織特異的発現をノーザン分析で調べたところ、脳、胸腺、腎臓、副腎、牌臓および精巣に発現が認められた。この結果を踏まえて、現在マウス E(z)相同遺伝子のmRNA及び蛋白質の胚発生における局在とその消長を、whole mount in situ hybridization法と免疫組織化学的手法を用いて明らにすることを試みている。

The applicant に, the <s:1> research implementation plan of the previous year に followed the って research を line に, and the <s:1> result of this study を obtained た. マ ウ ス god 経 bud cells swollen origin の に in cell lines Neuro - 2 a は, cultures of bovine fetal serum contains が ま where れ て い る と, undifferentiated state な と な り ア メ ー バ form を と る. Youdaoplaceholder0 bovine fetal 児 serum を except for くと, Neuro-2a <s:1> protrusions を elongation, and に differentiation する of neurogenic cells. The <s:1> differentiation of Shinto cells えられる モデ モデ と と と study えられる. こ の モ デ ル department に お い て, マ ウ ス E (z) but same 伝 son の 発 now パ タ ー ン を, planning to write and び turn 訳 の struck side か ら 検 cable し た. の Northern analysis results, undifferentiated な Neuro - 2 a で は マ ウ ス E (z) but same 伝 son の planning write は, ほ と ん ど recognize め ら れ な い が, induced differentiation under で は planning write quantity が the し く raised plus し た. More に undifferentiated state と differentiation の Ncuro - 2 a に お い て, immunohistochemical technique を い て マ ウ ス E (z) is the same protein の bureau in を 検 cable し た. そ の results others, god 経 cells differentiation し に た Neuro - 2 a で は, cytoplasm, に protrusions の び nuclear に beginning base and a positive anti 応 が see ら れ, ま た undifferentiated な ア メ ー バ others の Neuro - 2 a で は, cytoplasmic の 辺 try に weak い positive anti 応 が 検 out さ れ た. The <s:1> <s:1> experimental results show that ら ら and ウス ウス E(z) are related to the <s:1> differentiation に of the same protein in <s:1> neural cells and the する possibility が suggest された. マ ウ ス E (z) is the same heritage 伝 の adult son に お け る tissue specific 発 now を ノ ー ザ ン analysis で べ た と こ ろ, 脳 is crucial, thymus, kidney, adrenal gland, viscera お よ び fine 巣 に 発 が now recognize め ら れ た. Tread こ の results を ま え て, now マ ウ ス E (z) but same 伝 son の mRNA and び protein の embryo 発 に お け る bureau in と そ の changeing を, whole mount in situ hybridization method と immunohistochemical technique を with い て Ming ら に す る こ と を try み て い る.

项目成果

Motoyuki Ogawa et al.: "Cloning and expression of a human/mouse Polycomb group gene,ENX-2/Enx-2" Biochimica et Biophysica Acta. 1395. 151-158 (1998)

Motoyuki Okawa 等人：“人/小鼠 Polycomb 组基因 ENX-2/Enx-2 的克隆和表达”Biochimica et Biophysicala Acta。

Motoyuki Ogawa et al.: "Cloning and expresion of a human/mause Polycomb group gene,ENX-2/Enx-2" Biochimica et Biophysica Acta. 1395. 151-158 (1998)

Motoyuki Okawa 等人：“人/鼠 Polycomb 组基因 ENX-2/Enx-2 的克隆和表达”Biochimica et Biophysicala Acta。