モルヒネ禁断後のプレプロエンケファリンmRNA増加の分子メカニズム

吗啡戒断后前脑啡肽原mRNA增加的分子机制

• 批准号: 09770065
• 负责人: 藤田 優子
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770065/
• 关键词: モルヒネ禁断; プレプロエンケファリンmRNA; 中脳水道周囲灰白質; リン酸化CREB; c-Fcs; アンチセンスオリゴヌクレオチド; ウエスタンブロッティング法; in situ hybridization 法; morphine withdrawal; preproenkephalin; periaqueductal gray; protein kirase A; CREB; c-fos; rat

モルヒネ禁断時のラット尾側中脳水道周囲灰白質(cPAG)のプレプロエンケファリン(PPE)mRNAの増加におけるC-FosおよびcAMP系の関与を検討した。昨年度は、Aキナーゼ阻害剤およびc-fosのアンチセンスオリゴヌクレオチド(AO)の側脳室内前処置がこの増加を抑制することを明らかにしたが、cAMP response element binding protein(CREB)のAO1回前処置は影響を及ぼさなかった。そこで、本年度はモルヒネ禁断時のPAGにおけるc-Fosおよびリン酸化CREB(pCREB)量の変化、ならびにPPE mRNA増加に及ぼすCREBのAO2回前処置の影響を検討した。1 方法SD系雄性ラットにモルヒネ20-30mg/kgを5日間連投した。ナロキソン(NLX)によりモルヒネ禁断を誘発し、NLX投与1、2および4時間後のPAGのc-FosおよびpCREB量をウエスタンブロッティング法により定量した。一方、NLX投与8および12時間前にCREBのAO 5nmolを側脳室内投与し、NLX投与4時間後のcPAGのPPE mRNA量を定量的in situ hybridization法に従って測定した。2 結果モルヒネ禁断時のPAGにおけるC-Fos量は、NLX投与1時間後から4時間後まで変化せず、pCREB量は、MLX投与1時間後にのみ増加する傾向を示した。CREBのAO2回前処置は、モルヒネ禁断後のcPAGにおけるPPE mRNAの増加を有意に抑制した。3 結語モルヒネ禁断時のcPAGのPPE mRNAの増加に、c-Fosに加えてCREBの関与が示唆された。しかし、モルヒネ禁断時のPAGにおけるc-FosおよびpCREB量の有意な増加は認められず、その原因として、cPAGに限局した測定ではなかったことが考えられ、現在、cPAG局所のこれら蛋白の変化を免疫組織学的に検討している。

During the shutdown, you need to check the gray color around the waterway (cPAG). Do not add the C-Fos (PPE) mRNA to the C-Fos system. Last year, A

项目成果

Fukunaga,Y: "Timecourse of morphine withdrawal and preproenkephalin gene expression in the periaqueductal gray of rats." Mol.Brain Res.55. 221-231 (1998)

Fukunaga，Y：“大鼠导水管周围灰质中吗啡戒断和前脑啡肽原基因表达的时间进程。”

Fukunaga,Y: "Effects of peptidase inhibitors [D-Ala^2,Met^5]-enkephalinamide and antiserum to methionine-enkephalin microinjected into the caudal periaqueductal gray on morphine withdrawal in rats." Jpn.J.Pharmacol.78. 455-461 (1998)

Fukunaga，Y：“肽酶抑制剂 [D-Ala^2，Met^5]-脑啡肽和甲硫氨酸脑啡肽抗血清显微注射到导水管周围灰质尾部对大鼠吗啡戒断的影响。”