単純ヘルペスウイルス誘導プロテインキナーゼの特性と役割について

单纯疱疹病毒诱导蛋白激酶的特点及作用

• 批准号: 09770203
• 负责人: 大黒 徹
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770203/
• 关键词: HSV; US3; プロテインキナーゼ; 単純ヘルペスウイルス

単純ヘルペスウイルス(HSV)のUS3プロテインキナーゼ(PK)はこれまで細胞質に存在する酵素であると考えられていたが、ウイルス感染中期にはむしろ核に存在することを間接蛍光抗体法により明らかにした。US3PKを単独発現させた場合でも核と細胞質の両方に分布した。これらの結果はUS3産物が単独でも核に移行することを示唆している。また新規ヌクレオシドアナログで抗ヘルペス効果のあるグアノシン誘導体(A-5021)の作用機序を解明した。この物質はHSVのチミジンキナーゼで1リン酸化されその後宿主のリン酸化酵素で3リン酸化されてウイルスDNAポリメラーゼを阻害した。既存の抗ヘルペス剤と比較では、アシクロビルより3リン酸型が安定で、ペンシクロビルよりDNAポリメラーゼに対する阻害作用が強いことがわかった。HSVのUL16、UL51遺伝子産物は未だ機能の明らかになっていない非必須(アクセサリー)遺伝子である。まず特異抗体を作製し、基本的性状解析をおこなった。感染細胞においてその発現をウエスタンブロッティングで確認したところ各産物の分子量はそれぞれ40K127〜30KDaであった。UL51産物は感染細胞内でリン酸化による修飾を受けるため分子量が増大することがわかった。さらに蛍光抗体法で各産物の細胞内局在を検討した。UL16産物は核では小さな顆粒状に、細胞質では全体的に拡散して存在することが確認された。またUL16産物にはDNA結合活性があることが示された。UL51は細胞質、とくに核周囲に多く局在した。

単 pure ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス (HSV) の US3 プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ (PK) は こ れ ま で cytoplasm に exist す る enzyme で あ る と exam え ら れ て い た が, ウ イ ル ス infection medium-term に は む し ろ nucleus に す る こ と を 蛍 indirect light antibody technique に よ り Ming ら か に し た. US3PKを単 is exclusively found in させた sites で <s:1> nucleus と cytoplasm に sides に distribution た た. The result is that the <s:1> US3 product が単 is independent of で <s:1> nucleus に, and the migration is する とを とを, which indicates that the て て る る is る. ま た new rules ヌ ク レ オ シ ド ア ナ ロ グ で resistance ヘ ル ペ ス unseen fruit の あ る グ ア ノ シ ン inductor (A - 5021) の function machine sequence を interpret し た. こ の material は HSV の チ ミ ジ ン キ ナ ー ゼ で 1 リ ン acidification さ れ そ の after host の リ ン acidification enzyme で 3 リ ン acidification さ れ て ウ イ ル ス DNA ポ リ メ ラ ー ゼ を resistance against し た. Existing の resistance ヘ ル ペ ス tonic と compare で は, ア シ ク ロ ビ ル よ り 3 リ ン acid type が stability で, ペ ン シ ク ロ ビ ル よ り DNA ポ リ メ ラ ー ゼ に す seaborne る strong resistance against role が い こ と が わ か っ た. Traces of HSV の UL16, UL51 伝 の Ming zi chan content は not だ function ら か に な っ て い な い must not (ア ク セ サ リ ー) heritage 伝 son で あ る. The production of まず specific antibodies を and the analysis of their basic properties をお なった なった. Infected cells に お い て そ の 発 now を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ で confirm し た と こ の ろ each product molecular weight は そ れ ぞ れ k127 40 ~ 30 kda で あ っ た. The UL51 product is subjected to でリ <s:1> acidification による modification を in the infected cells, and the けるため molecular weight が increases, and the する とがわ とがわ った った った った った った った った った った った is modified. Youdaoplaceholder0 photoantibody method で each product <s:1> intracellular localization at を検 to discuss た. Product UL16 は nuclear で は small さ な granular に, cytoplasmic で は all に company, scattered し て exist す る こ と が confirm さ れ た. The DNA binding activity of the またUL16 product に がある とが とが shows された. UL51 とくに cytoplasm and とくに perinuclear 囲に are mostly く localized in <s:1> た.

项目成果

Yamamada H.: "Characterization of the UL55 gene product of herpes simplex virus type2" J.Gen.Virol.79. 1989-1995 (1998)

Yamamada H.：“2 型单纯疱疹病毒 UL55 基因产物的表征”J.Gen.Virol.79。

Oshima S.: "Characterization of the UL16 gene product of herpes simplex virus type2" Arch.Virol.143. 863-880 (1998)

Oshima S.：“2 型单纯疱疹病毒 UL16 基因产物的表征”Arch.Virol.143。

Daikoku T.: "Identification and characterization of herpes simplex virus type 1 UL51" J.Gen.Virol.79. 3027-3031 (1998)

Daikoku T.：“1 型单纯疱疹病毒 UL51 的鉴定和特征”J.Gen.Virol.79。

Jiang Y-M.: "Characterization of the US2 gene product and its defective mutant of herpes simplex virus type2" J.Gen.Virol.79. 2777-2784 (1998)

Jiang Y-M.：“单纯疱疹病毒2型US2基因产物及其缺陷突变体的表征”J.Gen.Virol.79。

Tatsuya Tsurumi: "Strand displacement associated DNA synthesis catalzed by the Epstein-Barr virus DNA polymerase" Biochemical and Biophysical Research Communication. 238. 33-38 (1997)

Tatsuya Tsurumi：“由 Epstein-Barr 病毒 DNA 聚合酶催化的链置换相关 DNA 合成”生物化学和生物物理研究通讯。