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細胞障害性Tリンパ球による肝細胞癌特異抗原の認識機構について

细胞毒性T淋巴细胞对肝癌特异性抗原的识别机制

基本信息

批准号：
09770350
负责人：
岡田和彦
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

【腫瘍抗原ペプチドの解析】1 腫瘍細胞表面に提示されているペプチドの分画現在、培養肝癌株を低いpHの条件で処理しMHCクラスI分子とともに癌細胞表面から剥がれてくる雑多な抗原ペプチドを回収しHPLCカラムを用いて各分画を解析中である。下記のアッセイによる分析が可能となる分画が得られる処理条件が得られるまで反復する必要があろう。またこれまでに試していない培養株を用いて抗原ペプチドを採取する予定である。2-(1) 細胞障害活性測定によるアッセイMHCの一致したB細胞株を^<51>Crで標識して標的細胞とし、得られた分画と混合してB細胞上のMHC分子とペプチドを結合させ、対応するCTLによる細胞障害活性を測定した。これまでの所、混合した標的細胞がCTL,により壊されるような特定の分画は得られていない。抗原提示細胞として用いるB細胞株にペプチドを表出させる条件設定が重要であると考えられる。さらに標的細胞となるB細胞株としてこれまでとは異なるものを試みる予定である。2-(2) サイトカイン産生誘導によるアッセイB-1と同様にMHCの一致したB細胞株に各分画を加えてMHC分子にペプチドを結合させ、CTLと混合培養し培養液中のサイトカイン濃度を測定した。この実験においても、これまでの解析ではサイトカイン産生を誘導するような特定の分画は確認されていない。B-1同様MHC分子にペプチドをローディングさせる条件を様々に変えて反復する必要がある。

[Analysis of tumor antigen selection] 1. Tumor cell surface detection and analysis. Liver cancer cell lines were cultured under low pH conditions. MHC I molecules were extracted from tumor cell surface. The following is a summary of the analysis of the possible and possible conditions. The test was conducted on a pre-determined basis. 2-(1) Determination of cell damage activity of MHC molecules in B cell lines identified as target cells, and determination of cell <51>damage activity of MHC molecules in B cell lines identified as target cells. The target cells are CTL, and the target cells are mixed. Antigen prompt cells are used in B cell lines. The target cell line B was isolated and tested. 2-(2) The concentration of MHC in culture medium was determined by adding MHC molecules to B cell lines for each fraction. The analysis of this information is to induce the production of specific information. B-1 isoform MHC molecule