吸収上皮細胞増殖におけるFru2,6・P2,SGLT1発現調節の解明

阐明吸收性上皮细胞增殖中 Fru2、6、P2 和 SGLT1 表达的调节

基本信息

  • 批准号:
    09770356
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 1998
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ラット小腸切除後のadaptationにおける吸収上皮細胞のグルコース吸収とグルコース代謝を検討するため以下の実験を行った。ラットをペントバルビタール麻酔下に開腹、小腸を近位側から85%切除して吻合し閉腹した。手術後1、3、5、7日目に残存回腸より粘膜を剥離しAGPC法でtotal RNAを抽出、アガロースゲル泳動後ナイロンメンブランに転写した。まず、グルコース輸送担体SGLT1にてノーザンプロットを行ったところ・術後1日目からmRNAのシグナルは軽度増強し7日目まで持続した。しかし、バンドが不鮮明なため、SGLT1の異なる部分から作成したプローブを用いてノーザンブロットを再度行う予定である。現在さらに2個のプローブを作成し、結果を比較検討した。一方、グルコース代謝を調節するFru2,6-P2はアイソザイムがあり、心、肝、睾丸、脳で各々異なっている。このためまず、小腸のFru2,6-P2を同定するためにラット小腸total RNAより共通部分をRT-PCRにて増幅したところ単一バンドが得られた。これをTAクローニングベクターに挿入し大腸菌JM109にて増幅、得られたプラスミドより約500bPのプローブを作成した。
のadaptation after small intestine resection, epithelial cell absorption, metabolism, and metabolism. The ラットをペントバルビタール马锔was performed through laparotomy, and the proximal side of the small intestine was 85% resected, anastomosis was performed, and the abdomen was closed. On the 1st, 3rd, 5th, and 7th day after the operation, the remaining ileal mucosa was peeled off and the total RNA was extracted using the AGPC method, and the remaining ileal mucosa was extracted after swimming.まず、グルコースConveyor carrier SGLT1にてノーザンプロットを行ったところ・On the 1st day after the operation, the level of the mRNA was increased and the strength was increased, and the 7th day after the operation was done.しかし, バンドが不明なため, SGLT1 のdifferent なるpartial work The したプローブを uses the いてノーザンブロットを to perform the predetermined である again. Now I've made two new ones, and the results are pretty good. On the one hand, グルコースmetabolite regulation するFru2,6-P2 はアイソザイムがあり, heart, liver, testis, 脳でeach different なっている.このためまず、small intestineのFru2,6-P2を同定するためにラットsmall intestine total The common part of RNA is RT-PCR, which is amplified by RT-PCR.これをTAクローニングベクターにinsertしcoliform JM109にて嗗The width of the paper is about 500 bP, and it is made of られたプラスミドよりのプローブを.

项目成果

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  • 通讯作者:
    安藤 朗

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