肝免疫担当細胞(Kupffer細胞、Pit細胞)による肝細胞癌の増殖抑制機序:NOおよびTNF-αの関与

肝脏免疫活性细胞（Kupffer细胞、Pit细胞）抑制肝癌增殖的机制：NO和TNF-α的参与

• 批准号: 09770382
• 负责人: 渡部 直行
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770382/
• 关键词: Kupffer細胞; Pit細胞; 肝細胞癌; NO; TNF-α; アポトーシス; オステオポンチン; 肝癌細胞DNA障害; 接着因子; 共焦点レーザー顕微鏡

本研究では、肝免疫担当細胞の一つであるKupffer細胞によるNOおよびTNF-αの放出動態の解明を行った.またさらに、これらによる肝癌細胞障害や肝癌細胞内DNA断片化(アボトーシス)との時間的空間的相関およびその制御機構の解明を行った.まずKupffer細胞と肝癌細胞の共培養系におけるNO・TNF-α産生の定量と、転写因子活性化ならびにアボトーシスを蛍光を用いて可視化、定量するシステムを確立した。この結果、Kupffer細胞と肝癌細胞を共培養することにより、接着因子CD18/ICAM-1を介した肝癌細胞との接着反応からKupffer細胞の転写因子NF-κBが活性化され、iNos・TNF-αのmRNAの転写が促進されることが明らかとなった.これにより、Kupffer細胞から放出されたNo・TNF-αが相乗効果的に肝癌細胞に対してアボトーシスを引き起こすことが明らかとなった.近年、NK(Natural Killer)細胞を初めとするリンパ球系細胞から放出されるオステオボンチンというペプチドがマクロファージ等のiNOS誘導を阻害することが報告され、新たな免疫・抗癌活性調節機序として注目を集めている.このNK活性を有するPit細胞とKupffer細胞を共培養することにより、Kupffer細胞由来NOによるPit細胞のオステオボンチンや抗肝癌活性に対する影響を、またPit細胞由来オステオボンチンによるKupffer細胞のNO・TNF-α産生および抗肝癌活性に及ぼす検討を行っている。

This study was conducted to elucidate the dynamics of NO and TNF-α release from Kupffer cells. The time and space correlation of DNA fragmentation in hepatocellular carcinoma cells and the understanding of its regulatory mechanism are discussed. Quantification of NO·TNF-α production and activation of TNF-α in co-culture of Kupffer cells and hepatoma cells The results showed that co-culture of Kupffer cells and hepatocellular carcinoma cells was mediated by CD18/ICAM-1, and activation of NF-κB, mRNA expression of iNOS TNF-α, and mRNA expression of TNF-α was promoted by Kupffer cells. No TNF-α was released from Kupffer cells, and no TNF-α was released from Kupffer cells. In recent years, NK(Natural Killer) cells have been reported to inhibit the induction of iNOS by cell line cells, and new immune and anticancer activity regulatory mechanisms have been reported. The effect of NK activity on Pit cells and Kupffer cells co-cultured with NO, TNF-α production and anti-hepatoma activity of Pit cells and Kupffer cells was studied.

项目成果

渡部直行: "虚血再還流胃粘膜障害におけるNO合成酵素系の空間的遷移。" Ulcer Research(実験潰瘍). 23. 151-155 (1996)

Naoyuki Watanabe：“缺血再灌注胃粘膜损伤中 NO 合酶系统的空间转变。”（实验性溃疡）。

Kurose I: "CD18/ICAM-1 dependent nitric oxide production of Kupffer cells as a cause of mitchondrial dysfunction in hepatoma cells:Influence of chronic alcohol feeding." Free Radical Biol Med. 22. 229-239 (1997)

Kurose I：“库普弗细胞 CD18/ICAM-1 依赖性一氧化氮生成是肝癌细胞线粒体功能障碍的原因：长期饮酒的影响。”