权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

水疱症をモデルとした細胞骨格・細胞接着制御におけるプロテインキナーゼCの役割

蛋白激酶 C 在大疱性疾病模型中调节细胞骨架和细胞粘附的作用

基本信息

批准号：
09770623
负责人：
江崎智香子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770623/
关键词：
PKC PKM ケラチン水疱症

项目摘要

細胞骨格・細胞接着系の構造分子は細胞外シグナルに対応し、細胞の分化増殖に深く関わっている。自己免疫性水疱症の1つである天疱瘡の水疱形成メカニズムにおいて、カルシウム依存性シグナル伝達とホスホリパーゼCの関与、プロテインキナーゼC(PKC)各アイソザイム間の発現および活性動態の差が示されてきた。本研究は、表皮細胞の細胞骨格・接着の動体構造に関してその障害である水疱症をモデルとし、天疱瘡抗体によって惹起される細胞骨格・細胞接着系の構造分子、特にケラチンおよびデスモソーム構造分子のPKCによるリン酸化を検討し、PKCによる機能的制御機構を、基礎的細胞生物学的に解明しようとするものである。本年度は、PKCの活性化を誘導すると考えられているホルボールエステルの1つである12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)を刺激として、ヒト有棘細胞癌由来培養DJM-1細胞におけるPKCおよびPKM(PKCの調節部分を欠いた活性部分Mキナーゼ)の局在を、PKCアイソザイム抗体を用いたウェスタンブロッティング法によって検討した。その結果、PKCαおよびηに対する抗体でPKMは検出されたが、PKCδおよびεには検出されなかった。PKMαは、細胞質、細胞膜、細胞骨格画分すべてに存在したが、PKMηは細胞質画分のみで観察された。さらにDEAE-Sephacel columnによってPKCとPKMを分離し各々の活性を測定したところ、細胞質画分において二峰性の活性がみられ、モノクローナル抗PKCa抗体を添加することにより活性の抑制がみられた。次いで、高濃度KCl不溶性画分(ケラチン画分)におけるPKCの発現とPKC活性の検討を行い、ケラチン画分でのPKCaおよびPKMa、PKCeの存在を観察した。以上より、ヒト表皮細胞において、PKMαおよびηが存在し、それらはリン酸化能を保持し、PKCおよびPKMがケラチン蛋白リン酸化制御に関与する可能性が示唆された。

The cell of the bone cell is followed by the molecular maker, the extracellular cell, the cell differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the differentiation, the proliferation, the differentiation, the proliferation. Autoimmune blister disease is characterized by the formation of vesicles, the formation of In this study, the epidermis cell bone lattice is followed by the animal body to make the animal body to prevent the injury of vesicular disease, vesicular disease, pemphigus antibody, then the cell bone cell is caused by the cell bone cell, and then the cell is made by the molecule, the molecule, the PKC molecule, the acidification mechanism, the PKC mechanism, and the control mechanism. The understanding of basic cell biology. This year, PKC has been activated and tested. This year, it has been reported that 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) stimuli, DJM-1 cell carcinomas (DJM-1 cells), PKC cells (PKC cells), PKM (PKC cells) are not available in this year. The antibody against PKC was detected by the method of antibody. the antibody was detected by Elisa. The results showed that the antibodies against PKC α were detected by Elisa, and the antibodies by PKC δ were detected by Elisa. PKM α, cytoskeleton, cytomembrane, cytoskeleton, cytomembrane, cytoskeleton, cyt The DEAE-Sephacel column, the PKC, the PKM, the activity, the anti-PKCa antibody, the anti-PKCa antibody, the anti-PKCa antibody. Sub-and high-resolution KCl insoluble painting scores (high-resolution painting points). PKC images show that the PKC activity is high, and the PKCa activity is detected. The PKMa and PKCe are detected. The epidermis, epidermis, epidermis