大腸癌の肝転移におけるTGF-β1の活性化機構および機能の解明

1. TGF-β1活性化因子の解明ヒト肝細胞株tPH5CHとヒト大腸癌細胞株(高転移株,低転移株)とのco-cultureにおける培養土清中のTGF-β1(活性化型,潜在型)の定量をELISAで行った.高転移株HT-29のco-cultureでは培養2日目に活性化型TGF-β1の濃度はtPH5CHとHT-29の各々の単独培養に比し有意に増加していた.しかし,活性化型TGF-β1と潜在型TGF-β1の総量については有意差を認めなかった.この結果からtPH5CHとHT-29のco-cultureにより,TGF-β1の活性化が促進されていると考えられた.一方,非転移株Colo205とtPH5CHとのco-cultureにおいて,TGF-β1の活性化は各々の単独培養との有意差を認めなかった.したがって,大腸癌肝転移とTGF-β1活性化に密接な関連性が示唆された.2. TGF-β1のreceptor解析ヒト肝細胞株tPH5CHとヒト大腸癌細胞株HT-29とのco-cultureの系におけるTGF-β1のreceptorの変化をaffinityassay,Westernblottingにて検討している.3. TGF-β1の肝転移における作用の解明in vitroにおいて肝線維芽細胞の培養液にヒトリコンビナントTGF-β1を添加すると,肝線維芽細胞のfibronectinの産生が増加した.したがって,fibronectinを介した転移形成にTGF-β1が関与していると考えられた.4. TGF-β1とヒト大腸癌肝転移との相関の検討臨床材料を用いて,肝転移巣と原発巣における,TGF-β1の発現の分布や強度の差異を免疫組織染色にて検討中である.大腸癌患者の血清中のTGF-β1濃度と肝転移との相関を検討中である.

1. TGF-β1活性化因子の解明ヒト肝細胞株tPH5CHとヒト大腸癌細胞株(高転移株,低転移株)とのco-cultureにおける培養土清中のTGF-β1(活性化型,潜在型)の定量をELISAで行った.高転移株HT-29のco-cultureでは培養2日目に活性化型TGF-β1の濃度はtPH5CHとHT-29の各々の単独培養に比し有意に増加していた.しかし,活性化型TGF-β1と潜在型TGF-β1の総量については有意差を認めなかった.この結果からtPH5CHとHT-29のco-cultureにより,TGF-β1の活性化が促進されていると考えられた.一方,非転移株Colo205とtPH5CHとのco-cultureにおいて,TGF-β1の活性化は各々の単独培養との有意差を認めなかった.したがって,大腸癌肝転移とTGF-β1活性化に密接な関連性が示唆された.2. TGF-β1のreceptor解析ヒト肝細胞株tPH5CHとヒト大腸癌細胞株HT-29とのco-cultureの系におけるTGF-β1のreceptorの変化をaffinityassay,Westernblottingにて検討している.3. TGF-β1の肝転移における作用の解明in vitroにおいて肝線維芽細胞の培養液にヒトリコンビナントTGF-β1を添加すると,肝線維芽細胞のfibronectinの産生が増加した.したがって,fibronectinを介した転移形成にTGF-β1が関与していると考えられた.4. TGF-β1とヒト大腸癌肝転移との相関の検討臨床材料を用いて,肝転移巣と原発巣における,TGF-β1の発現の分布や強度の差異を免疫組織染色にて検討中である.大腸癌患者の血清中のTGF-β1濃度と肝転移との相関を検討中である.