細胞外ATPによる内耳前庭神経節細胞の細胞内カルシウムイオン動態に関する研究

利用细胞外ATP研究内耳前庭神经节细胞内钙离子动力学

• 批准号: 09771392
• 负责人: 井上 俊哉
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771392/
• 关键词: 前庭神経節細胞; ATP; カルシウムイオン; P_2-receptor; 求心性神経伝導物質; 内耳前庭; 求心性神経伝達物質

モルモットの前庭神経節細胞を生きたまま単離し、ATP刺激時の細胞内Ca^<2+>動態を検討した。抗ニューロフィラメント抗体(NF200)を用いて単離した前庭神経節細胞を同定した。単離した前庭神経節細胞をATP刺激したところ、濃度依存的に細胞内Ca^<2+>濃度の上昇が観察された。細胞外Ca^<2+>-freeの状態においてもATP刺激にて細胞内Ca^<2+>濃度の上昇を認めた。これらのことから、ATP刺激による細胞内Ca^<2+>濃度上昇は外部動員および内部動員の両者に依存するものと考えられた。次にATPの受容体であるP_2-purinergic receptorの拮抗剤であるReactive blue2、Suraminそれぞれの存在下では、ATPによる細胞内Ca^<2+>濃度の上昇は両者共に濃度依存的に抑制された。P_1-purinergic receptorに親和性を有するAdenosine刺激では、細胞内Ca^<2+>濃度の変化は認められなかった。これらのことから、モルモット前庭神経節細胞にP_1ではなくP_2-purinergic receptorが存在し、ATP刺激による細胞内Ca^<2+>濃度の上昇機構はP_2-purinerric receptorを介したものであることが示唆された。また陽イオン透過性カルシウムチャネルのblockerであるLaCl_3の存在下では、ATP刺激時の細胞内Ca_2濃度の上昇は抑制され、電位依存性L型カルシウムチャネルのblockerであるNiffedipineの存在下では抑制されなかった。これらのことから、外部動員による細胞内Ca_2濃度の上昇機構はLaCl_3-sensitiveなカルシウムチャネルからの流入によることが示唆された。以上のことから内耳前庭において細胞外ATPが求心性の神経伝達物質または神経修飾物質としての働きがある可能性が示唆された。

A study of intracellular Ca^<2+> dynamics in vestibular ganglion cells during ATP stimulation Anti-vitiligo antibody (NF200) was used to isolate vestibular ganglion cells. ATP stimulation of vestibular ganglion cells was observed in a concentration-dependent manner. Extracellular Ca^<2+>-free status was detected by ATP stimulation, and intracellular Ca^<2+> concentration increased. The increase of intracellular Ca^<2+> concentration due to ATP stimulation is dependent on external mobilization and internal mobilization. In the presence of ATP receptor, P_2-purinergic receptor antagonist, Reactive blue2, Suramin, ATP receptor, intracellular Ca^<2+> concentration, and concentration-dependent inhibition. P_1-purinergic receptor affinities are regulated by Adenosine, and intracellular Ca^<2+> concentrations are regulated by adenosine. P_1-purinergic receptor exists in vestibular ganglion cells, and the mechanism of intracellular Ca ~(2+) concentration increase induced by ATP stimulation is mediated by P_2-purinergic receptor In the presence of LaCl_3, the increase of intracellular Ca_2 concentration stimulated by ATP was inhibited, and in the presence of Niffedipine, the potential-dependent L-type blocker was inhibited. The mechanism of the increase of intracellular Ca_2 concentration is LaCl_3-sensitive, and the mechanism of the increase of intracellular Ca_2 concentration is LaCl_3-sensitive. The possibility of these changes in extracellular ATP in the vestibule of the inner ear is demonstrated.