家兎眼毛様体無色素上皮細胞によるwater channel proteinの研究

兔眼睫状体色素上皮细胞水通道蛋白的研究

• 批准号: 09771478
• 负责人: 鈴木 康之
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo (1998)Nippon Medical School (1997)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771478/
• 关键词: water channel protein; 水輸送; 家兎; メッセンジャーRNA; cDNA; 毛様体; PCR; 分子生物学; CHIP; MIWC

白色家兎genomic DNAを抽出してtemplateとし、水選択性チャンネル蛋白(water channel protein)であるaquaporin1(Channel-forming integral potein,CHIP)およびaquaporin4(mercuryinsensitive waterchannel protein,MIWC)について、すでに報告されているヒトおよびラットの共通アミス酸配列、cDNA配列よりdegenerate primerを作成し、これを用いてpolymerase chain reaction(PCR)を行うことにより、白色家兎におけるCHIPおよびMIWCに相当すると思われる遺伝子配列の一部を増幅した。PCR産物をcycle sequenceによりその塩基配列を決定したところ、それぞれヒトおよびラットのCHIP、MIWCと相同性が高く、白色家兎におけるCHIPおよびMIWCの遺伝子配列の一部であると結論した。次に白色家兎眼球組織(網膜、虹彩ー毛様体、脈絡膜、角膜上皮)よりmRNAを抽出し、RT-PCR法によって、それぞれの組織にCHIPおよびMIWCが発現していることを確認した。また、5′-RACE法および3′-RACE法によりそれぞれのcDNA配列を広い範囲で決定した。さらに、判明したMIWCのcDNA西びりを元に螢光プローブを作成し、それぞれの組織におけるmRNA発現量をリアルタイム検出による定量的RT-PCR法によって解析し比較検討したうその結果、白色家兎ではMIWCは網膜に比べ虹彩一毛様体、脈絡膜において多く発現しており、一方、角膜上皮ではほとんど発現していないことが明らかとなった。以上より毛様体における房水産生を含む眼組織の水輸送にwater channel proteinが関与していることが示唆された。

White house genomic DNA extracted template protein (waterchannel protein), aquaporin1 (Channel-forming integral potein,CHIP) and aquaporin4 (mercuryinsensitive waterchannel protein). MIWC) use polymerase chain reaction (PCR) to make a list of common acid, polymerase chain reaction (PCR), white goods, CHIP, MIWC, and so on, to make sure that you have a picture. PCR products such as CHIP, MIWC, MIWC, white goods, CHIP, MIWC, etc. One of the most important parts of this article is based on the basic configuration, which determines the number of people who are similar to each other. The secondary white eyeball tissue (network, iridotrichal body, hair membrane, corneal epithelium) was examined by mRNA extraction, RT-PCR, and RT-PCR. The results showed that the MIWC was confirmed. The 5'-RACE method, the 3'-RACE method, the 3'-RACE method, the cDNA configuration range, the decision range. In this paper, it is determined that the light source of the MIWC cDNA is made, and the tissue is used to measure the mRNA content. The RT-PCR method is used to analyze the quantitative analysis of the results. The results show that the results of the MIWC network are better than that of the iridescent body, the color of the film, the color of the body, the color of the film, the color of the skin, the color of the skin, The epithelium of the cornea shows that there is no sign in the cornea. The above information about aqueous humor hygiene includes the organization of the eye to send water to water channel protein and to inform you that it is instigated.

项目成果

山口 貴: "ウサギ眼組織におけるwater channel protein" あたらしい眼科. 16(印刷中). (1999)

Takashi Yamaguchi：“兔眼组织中的水通道蛋白”，新眼科学 16（出版中）。