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歯の萌出を誘導する骨吸収因子：歯胚由来細胞による破骨細胞形成について

诱导牙齿萌出的骨吸收因子：关于牙胚衍生细胞形成破骨细胞

基本信息

批准号：
09771830
负责人：
川上正良
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771830/
关键词：
歯の萌出 dental follicle 破骨細胞 conditioned medium 細胞培養 c-fms 免疫組織学

项目摘要

1.Dental follicle由来細胞培養系の確立生後6〜7日齢S.D.ラットの下顎骨から第1・2臼歯歯胚を摘出し、dental follicle cellを分離培養した。2〜3回の継代後dental follicle cellは、旺盛な増殖能を有し、紡錘形で線維芽細胞様の形態を呈していた。2.Dental follicle cellの破骨細胞形成誘導能について1で得られた細胞のconditioned mediumを採取し、マウスの骨髄細胞培養系に添加して、破骨細胞の形成能を有しているかについて検討した。10nM1,25(OH)_2D_3添加α-MEM中では、培養7日目で13.7±10.6/wellのTRAP(十)多核巨細胞の形成が認められたが、培養14日目では6.0±4.7/wellに減少した。Conditioned mediumを添加すると培養7日目で14.2±11.6/well形成されたTMAP(十)多核巨細胞が、14日目では、74.0±24.3/wellに増加した。Conditioned mediumによる破骨細胞形成促進は、濃度依存性であった。この結果、dental follicle cellから得られるconditioned mediumは、骨髄細胞からTRAP(十)多核細胞の形成を促進する効果が認められ、強力な破骨細胞形成促進因子を産生していることが示唆された。3.CSF-1 reseptor(c-fms)についてCSF-1は、破骨細胞形成に必須な因子であり、歯の萌出に必要な骨吸収との関係が示唆されている。そこで歯の萌出時におけるCSF-1の作用を検討するため、歯胚形成期から萌出期(生後0〜7日齢)のラットの歯胚に免疫組織学的染色を行い、歯胚におけるCSF-1の作用部位の検討を行った。この結果、CSF-1のreceptorをコードする遺伝子c-fmsが、歯胚周囲のTRAP陽性の破骨細胞に局在して認められた。しかも生後3日目をピークとして歯の萌出に伴い、c-fmsの発現は経時的に減少することも明らかとなった。

1. Dental follicle derived cell culture system was established 6 ~ 7 days after birth. The mandibular embryos were extracted from the first and second teeth and the dental follicle cells were isolated and cultured. After 2 ~ 3 generations, the morphology of dental follicle cell is changed. 2. Osteoclast formation induction in Dental follicle cells can be detected in conditioned medium, and osteoclast formation can be detected in osteoclast culture systems. 10nM1,25(OH)_2D_3 in α-MEM reduced the formation of multinucleated giant cells by 13.7±10.6/well at 7 days and 6.0±4.7/well at 14 days. When Conditioned medium was added, 14.2±11.6/well TMAP(ten) multinucleated giant cells were formed after 7 days of culture, and 74.0±24.3/well increased after 14 days of culture. Conditioned medium promotes osteoclast formation in a concentration-dependent manner. As a result, dental follicle cells are conditioned in medium, osteoclast cells are conditioned in medium and osteoclast cells are conditioned in medium. 3. CSF-1 receptor (c-fms) is an essential factor for osteoclast formation and bone resorption. To investigate the role of CSF-1 during tooth eruption, during tooth formation and during tooth eruption (0 - 7 days after birth), during tooth development and during tooth embryo immunohistological staining, and to investigate the role of CSF-1 in tooth embryo. The results showed that CSF-1 receptor expression was detected in c-fms, and TRAP-positive osteoclasts were detected in periapical tissues. 3 days after birth, c-fms will appear in the future.