歯根吸収に関する因子の解明(特にPGEk吸収組織内の局在について)

阐明与牙根吸收相关的因素（特别是 PGEk 吸收组织内的定位）

• 批准号: 09771837
• 负责人: 清水 謙
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771837/
• 关键词: 歯根吸収; 歯根吸収組織; 酵素抗体法; 蛍光顕微鏡

本研究の目的は,生理的な乳歯の歯根吸収時に生じる歯根吸収組織中のプロスタグランディンE_2(以下PGE_2)の局在について検討することであり,その実験として有効なウサギの歯根吸収組織に適した免疫組織学的手法を確立することであった.まず,適切な免疫染色法を検討するために,本研究のRIAを用いた予備実験によってウサギの上顎乳切歯歯根吸収組織において最も多くPGE_2が生合成される時期であることが認められている9日齢の仔ウサギを用いて実験を行った.上顎乳切歯を摘出し,4℃,24時間緩衝ホルマリンで固定し,4℃でEDTAにより3日間脱灰した後,液体窒素において0.T.C compoundに包埋した.クリオスタットを用いて6μmの切片とした.免疫組織学的染色はニチレイ社製のHistfine(R)を用いてABC法にて行った.モノクロナール抗体にはCayman Chemical社の抗PGE_2を用い,PBSで1/10希釈,1/100希釈,1/500希釈および1/1000希釈して,染色の至適濃度について検討した.その結果,抗PGE_2の4種類のどの濃度においても歯根吸収組織は良好な染色性を示した.ただ,多くの標本は非特異的な染まり方をしておりPGE_2の局在の同定までには至らなかった.これにはこの抗体がウサギを用いて作られており,そのため一次抗体が非特異的な反応をしているのではないかと考えられる.一次抗体をかけるまでにウサギの正常血清の抗体をかけてブロックしておくなどの工夫が必要であると考えられ,現在も抗体,固定,脱灰,染色性等の吟味を継続して行っている.

The purpose of this study is to analyze the physiological effects of breast milk absorption and root absorption in tissues.タグランディンE_2 (hereinafter PGE_2)'s game is in について検検恙ることであり,その実験として Effective なウサギの歯Absorbing tissue にAdaptable したThe technique of immunohistology has been establishedすることであった.まず, appropriately なimmunostaining method を検するために, this study のRIAを Use the いたpreparationミ験によってウサギのmaxillary mastectomy and root absorption tissue においてmostも多くPGE_2 が生综合される Period であることがcognize められている9日齢の子ウサギをUse the いて実験を行った. The upper palate breast is cut and removed, 4℃, 24-hour buffering ホルマリンでAfter fixation, 4℃, EDTA solution, 3 days of deliming, liquid sterilization solution, 0.T.C Compound embedding, クリオスタットを, 6 μm sectioning, immunohistological staining, Histfine(R) made by レイ Company uses いてABC method and にて行った.モノクロナールantibody にはCayman Chemical company's anti-PGE_2 is used, PBS is 1/10, 1/100, 1/500, 1/1000, dyeing is to the appropriate concentration. .The result is that the anti-PGE_2 4 types and concentration are good in root absorption tissue. Sex を Show し た. た だ, many く の specimens は non-specific な dye ま り square を し て お り PGE_2 bureau in のSame as までには to らなかった.これにはこのantibodies がウサギを用いて为られており,そprimary antibody non-specific primary antibodyかけるまでにウサギのNormal serum のantibodies をかけてブロックしておくなどの久久がであると卡えられ, and now も　　　, fixation, degreasing, stainability, etc.