アビジン-ビチオン標識酵素累積膜の方向規則性制御と酵素センサーへの展開

亲和素-二硫酮标记酶累积膜的方向规律性控制及其在酶传感器中的应用

• 批准号: 09771938
• 负责人: 陳 強
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771938/
• 关键词: バイオセンサー; 酵素; 累積膜; アビジン; ビオチン

アビジンを金属電極表面に吸着させるとほぼ単分子層の表面修飾層が形成され、このアビジン修飾表面にビオチン標識酵素を作用させるとアビジンはビオチン部位を特異的に認識し、表面に酵素分子が単分子膜を形成する。また、この操作を繰り返すことより、蛋白質累積膜を形成することが可能で、バイオセンサーの感知電極の微小化に革新的な意味を持っている。アビジンの金属表面の吸着はほぼ単分子膜に形成できたが、吸着方向はたて、とよこ両方ある。よこの方向で吸着されると、単分子膜の累積に不利である。本研究はチオール類の自己集合膜を金表面に形成させ、チオールの長さ、末端残基の電荷、親水性などの違いによって、一層目のアビジンを分子レベルで規制した量ですべてたての方向に吸着させ、単分子膜を作製することに成功した。水晶振動子ミクロバランス(QCM)法で上記の膜の形成状態を評価した。さらに、新規的なアビジン、ストレプトアビジンの単分子膜の上でCholine OxidaseとCholine Esteraseの累積、交互累積によってコリンセンサーとセチルコリンセンサーを作製しQCM法により酵素の単分子膜の形成をこの方法によりコントロールできたことをかくにんし、その性能について調べた。

The surface modification layer of the single molecular layer adsorbed on the surface of the metal electrode is formed, and the surface modification layer of the single molecular layer is formed. The operation of the sensor electrode is stable, the formation of a protein accumulation film is possible, and the miniaturization of the sensor electrode is innovative. The adsorption on the surface of a metal is called molecular film. The direction of adsorption is different from that of accumulation of single molecular film. In this study, the formation, length, charge of terminal residues, hydrophilicity, molecular weight, molecular weight, orientation and adsorption of self-assembly films on gold surfaces were successfully studied. Evaluation of the film formation state in the crystal oscillator (QCM) method In addition, the accumulation and mutual accumulation of Choline Oxidase and Choline Esterase on the molecular membrane of the new regulation, the QCM method, the method of forming the molecular membrane of the enzyme, and the performance of the new regulation.

项目成果

J.Anzai: "Enzyme Sensirs Prepared by Layer-by-Layer Deposition of Enzymes on a Platinum Electrode through Avidin-Biotin Interaction" Sensors and Actuators. B52. 3-9 (1998)

J.Anzai：“通过亲和素-生物素相互作用在铂电极上逐层沉积酶制备的酶传感器”传感器和执行器。

Chen,Qiang: "Avidin-biotin system-based enzyme multilayer membranes for biosensor applications : Optimization of loading of choline esterase (ChE) and choline oxidase (ChOx) in the bienzyme membrane for acetylcholine biosensors" Electroanalysis. (印刷中). (1

陈强：“用于生物传感器应用的基于亲和素-生物素系统的酶多层膜：用于乙酰胆碱生物传感器的双酶膜中胆碱酯酶（ChE）和胆碱氧化酶（ChOx）的负载优化”（正在出版）。

Qrang Chen: "Avidin-Biotin System-Based Enzyme Multilayer Membranes for Biosensor Application: Optimization of Loading of Choline Esterase(ChE)and Choline Oxidase(ChOx)in the Bienzyme Membrane for Acetylcholine Biosensors" Electroanalysis. 10,No.2. 94-97

Qrang Chen：“用于生物传感器应用的基于亲和素-生物素系统的酶多层膜：用于乙酰胆碱生物传感器的双酶膜中胆碱酯酶（ChE）和胆碱氧化酶（ChOx）负载的优化”电分析。