Smith-Lemli-Opitz症候群でのコレステロール代謝異常の解析 -7-デヒドロコレステロールレダクターゼの機能異常-

Smith-Lemli-Opitz综合征胆固醇代谢异常分析 - 7-脱氢胆固醇还原酶功能异常 -

• 批准号: 09780558
• 负责人: 西野 秀昭
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780558/
• 关键词: Smith-Lemli-Opitz症候群; コレステロール; 7-デヒドロコレステロール; 小胞体膜; ステロール14レダクターゼ; HMGCoAレダクターゼ; ステロール感受性ドメイン; NADPH-シトクロムP-450レダクターゼ; 7-dehydrocholesterol; reductase; NADPH; cytochrome P-450; recessive disorder; iron-sulfur; Smith-Lemli-Opitz syndrome; cD

7-デヒドロコレステロールレダクターゼ(7R)は知恵遅れや発生異常を特徴とするSmith-Lemli-Opitz症候群の原因遺伝子と考えられている。7Rは補酵素としてNADPHを必要としているが、NADHでも反応が起こることや7R活性は小胞体膜に結合していることから、小胞体膜電子伝達系の関与が考えられた。そこでNADPH-シトクロムP-450レダクターゼ(fpT)に対する特異抗体とインキユベーションしたところ、7R活性が低下した。小胞体膜の中性界面活性剤による可溶化上清をDEAEセルロース力ラムでクロマトグラフイーを行ったところ、7R活性は精製したfpT存在下でのみ検出された。また小胞体膜を各種プロテアーゼで処理すると、7R活性は消失したが、精製fpTを加えることによって活性が回復した。以上のことから、7R活性は少なくとも7R分子とfpTから構成されていることが明らかになった。また7RcDNAの塩基配列から推定されたアミノ酸一次構造を他のホモロジーの高いタンパク質、ステロール14レダクターゼやラミンBレセプターと比較したところ、7R活性に特異的と考えられるアミノ酸配列が見い出された。またN末端アミノ酸は細胞質側に存在し、10回膜を貫通して細胞質ドメインを持つことが予想された。またジヌクレオチド結合モチーフは見い出されなかったが、ステロール感受性ドメイン様構造が第7番膜貫通部位に存在していた。7RはHMGCoAレダクターゼと同様7-デヒドロコレステロール水酸化物による活性調節を受ける可能性が示唆された。

7-デヒドロコレステロールレダクターゼ(7R)は知恵遅れや発璒特徴とするThe cause of Smith-Lemli-Opitz syndrome is えられている. 7R is necessary for supplementing enzymes, NADPH is necessary, and NADH is necessary for replenishing enzymes. 7R activity is related to the combination of the small cell body membrane and the small cell body membrane electronics.そこでNADPH-シトクロムP-450レダクターゼ(fpT)に対する-specific antibody とインキユベーションしたところ, 7R activity is low. Neutral interface active agent of small cell body membrane solubilized supernatant DEAE セルロース力ラムでクロマでのみ検出された in the presence of トグラフイーを行ったところ, 7R active は refined したfpT. The small cell body membrane has been treated with various treatments, the 7R activity has disappeared, and the purified fpT has been added and the activity has been restored. The above のことから, 7R active はなくとも7R molecule and とfpT から constitute されていることが明らかになった.また7RcDNAの塩塩arrayから presumed されたアミノ acid primary structure をのホモロジーの高いタンパク性、ステロール14したところ、7 R active and specific と え ら れ る ア ミノ acid combination が 见 い 出 さ れ た. The N-terminal amino acid is present on the cytoplasmic side, and the 10 membranes penetrate the cytoplasm and are maintained on the cytoplasmic side.またジヌクレオチドcombineモチーフは见い出されなかったが、ステThe structure of the ロールsensitivity ドメイン様 exists in the 7th membrane penetration part. 7RはHMGCoA レダクターゼと同様7-デヒドロコレステロールhydrated acid compound によるActivity regulation をThe possibility of being influenced by がされた.

项目成果

H.Nishino: "Participation of NADPH-cytochrome P-450 reductase and iron-sulfur active center in NADPH-sterol Δ7-reductase activity" FASEBJ.11・9. A1019 (1997)

H.Nishino：“NADPH-细胞色素 P-450 还原酶和铁硫活性中心参与 NADPH-甾醇 Δ7-还原酶活性”FASEBJ.11・9（1997）。

西野 秀昭: "NADPH-ステロールΔ7-レダクターゼ活性へのNADPH-シトクロムP-450レダクターゼと鉄-硫黄活性中心の関与" 脂質生化学研究. 39. 299-302 (1997)

Hideaki Nishino：“NADPH-细胞色素 P-450 还原酶和铁硫活性中心参与 NADPH-甾醇 Δ7-还原酶活性”脂质生物化学研究 39. 299-302 (1997)。