ヒト乳癌細胞の増殖ならびに浸潤転移におけるエイコサノイドの役割

类二十烷酸在人乳腺癌细胞增殖和侵袭性转移中的作用

• 批准号: 09780568
• 负责人: 高橋 吉孝
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780568/
• 关键词: アラキドン酸; シクロオキシゲナーゼ; プロスタグランジン; ヒト乳癌細胞株; TPA; matrix metalloproteinase; overexpression

ヒト乳癌細胞におけるエイコサノイドの役割を調るために、その生合成に関わるシクロオキシゲナーゼ(COX)の機能について検討した。まずヒト乳癌細胞株Hs578を超音波破砕し、^<14>C標識のアラキドン酸とインキュベートしたところ、有意なアラキドン酸代謝活性は認められなかった。しかし、細胞を1μMのPhorbol(TPA)で刺激した後アラキドン酸代謝を調べると、50倍程度のシクロオキシゲナーゼ(COX)産物の産生増加が認められ、主な産生物はプロスタグランジン(PG)E2であった。また、Hs578Tで誘導されてくるCOX活性は、COX-2蛋白の発現増加にることが、ウェスタンブロットおよびノザンブロットで示された。Hs578TにおけるCOXの役割を調べるため、この細胞にヒトCOX-1とCOX-2のcDNAを組み込んだ発現ベクターをトランスフェクトし、安定形質発現株(Hs578TCOX1とHs578TCOX2)を得た。10μg/mlのコンカナバリンAの存在下で、Hs578TCOX1とHs578TCOX2のいずれも、matrix metalloproteinasc-2(MMP-2)の活性化が、Mock細胞に比べ促進されていることが、ゼラチンザイモグラフィーで示された。また、これらの細胞で膜型MMP(MT-MMP)の発現をノザンブロットで調べると、Mock細胞に比べて、Hs578TCOX1TPAで8倍、Hs578TCOX2で12倍の上昇が観察された。しかしながら、これらの細胞でのMMP-2の活性化の促進は、インドメサチンでは抑制されなかった。また、TPAあるいはPGE2をHs578T細胞に作用させても、MMP-2の活性化の促進は認められなかった。このようにCOX-1とCOX-2は、いずれもMT-MMPの発現上昇を介して、癌の浸潤転移に重要なMMP-2の活性化を促すが、その機構についてはさらに検討が必要であることが示された。以上の内容は、COXが乳癌の浸潤転移に重要な役割を果たすことを明らかにしたという点で大きな意義があり、現在投稿準備中である。

ヒ ト breast cancer cells に お け る エ イ コ サ ノ イ ド の "を cutting adjustable る た め に, そ の biosynthesis に masato わ る シ ク ロ オ キ シ ゲ ナ ー ゼ (COX) の function に つ い て beg し 検 た. ま ず ヒ ト breast cancer cell lines Hs578 を ultrasound broken 砕 し, ^ < > 14 C logo の ア ラ キ ド ン acid と イ ン キ ュ ベ ー ト し た と こ ろ, intentionally な ア ラ キ ド ン acid metabolism activity は recognize め ら れ な か っ た. し か し, 1 mu M cells を の Phorbol (TPA) で stimulus し た after ア ラ キ ド ン acid metabolism を adjustable べ る と, degree of 50 times の シ ク ロ オ キ シ ゲ ナ ー ゼ (COX) product の produce raised plus が recognize め ら れ, Lord な produce は プ ロ ス タ グ ラ ン ジ ン (PG) E2 で あ っ た. ま た, Hs578T で induced さ れ て く る は COX activity, cox-2 protein の 発 now rights に る こ と が, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト お よ び ノ ザ ン ブ ロ ッ ト で shown さ れ た. Cut Hs578T に お け る COX の service を adjustable べ る た め, こ の cells に ヒ ト COX 1 と cox-2 の cDNA を group み 込 ん だ 発 now ベ ク タ ー を ト ラ ン ス フ ェ ク ト し, stable character 発 now strains (Hs578TCOX1 と Hs578TCOX2) を た. 10 mu g/ml の コ ン カ ナ バ リ ン で, in the presence of A の Hs578TCOX1 と Hs578TCOX2 の い ず れ も, matrix Metalloproteinasc - 2 (MMP - 2) の activeness が, Mock cell に than べ promote さ れ て い る こ と が, ゼ ラ チ ン ザ イ モ グ ラ フ ィ ー で shown さ れ た. ま た, こ れ ら で の cell membrane type MMPS (MT - MMPS) の 発 now を ノ ザ ン ブ ロ ッ ト で adjustable べ る と, Mock cell に than べ て, Hs578TCOX1TPA で 8 times, Hs578TCOX2 で 12 times の rise が 観 examine さ れ た. <s:1> ドメサチ ながら, った れら れら, で で MMP-2 <e:1> activation <e:1> of <s:1> <s:1> <s:1> cells promotes されな, <s:1> ドメサチ ドメサチ で で で で inhibits されな った った. ま た, TPA あ る い は PGE2 を Hs578T cells に さ せ て も, MMP - 2 の activeness の promote は recognize め ら れ な か っ た. こ の よ う に COX 1 と cox-2 は, い ず れ も MT - MMP の 発 now rising を interface し て, の infiltrating planning move important な に MMP - 2 の activeness を promote す が, そ の institutions に つ い て は さ ら に beg が 検 necessary で あ る こ と が shown さ れ た. Above の content は, COX が の breast cancer infiltration planning move important な に "を cut fruit た す こ と を Ming ら か に し た と い う で き big な meaning が あ り, now contribute to で あ る.

项目成果

Takahiro Kinoshita: "Growth stimulation and induction of epidermal growth factor receptor by overexpression of cyclooxygenases 1 and 2 in human colon carcinoma cells" Biochimica et Biophysica Acta. (in press). (1999)

Takahiro Kinoshita：“通过在人结肠癌细胞中过表达环氧合酶 1 和 2 来刺激和诱导表皮生长因子受体”Biochimica et Biophysical Acta。