リグニン生合成におけるペルオキシダーゼと4-クマル酸:CoAリガーゼの役割

过氧化物酶和 4-香豆酸:CoA 连接酶在木质素生物合成中的作用

• 批准号: 10760106
• 负责人: 堤 祐司
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Shizuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760106/
• 关键词: リグニン; 生合成; ペルオキシダーゼ; 4CL; 基質特異性

1.ペルオキシダーゼ遺伝子の単離と解析これまでに報告されているペルオキシダーゼのアミノ酸配列を基にPCRを行い、ペルオキシダーゼ断片(389bp)を増幅した。これをプローブとして用い、ポプラカルスのcDNAライブラリーをスクリーニングした。その結果、得られたペルオキシダーゼクローンの一つは、ほぼ完全長で927bpのオープンリーディングフレームを含み、これまでに知られているポプラのアニオン性ペルオキシダーゼと高い相同性を有していた。本遺伝子はポプラカルスおよびポプラ木部の両方で発現が確認された。一方、ポプラカルスからペルオキシダーゼアイソザイムを精製し、それらのアミノ酸配列を検討した。2.アンチセンス4CLポプラの作製と選抜ポプラ4CL遺伝子(4CL1と4CL2)をカリフラワーモザイクウィルス35Sプロモーターおよびxylem特異的発現プロモーターの下流にアンチセンス方向に接続した4つのアンチセンスコンストラクトをアグロバクテリウム(LBA4404)を用いる形質転換系よりポプラに導入した。カナマイシンを含む選抜培地上で形質転換体を選抜し、最終的に形質転換体13個体を得た。これらの形質転換体の中で6個体は4CL活性がコントロールに対し約90%程度抑制されていた。これら4CL活性が抑制された個体を含む、全ての形質転換体のリグニン分析を行った結果、形質転換体のリグニン含有量やシリンギル/グアイアシル組成比に有意な差は認められず、リグニン生合成における4CLの制御的機能は小さいことが示唆された。

1. The analysis of the sequence of DNA fragments reported in this paper is based on the sequence of DNA fragments (389bp). This is the first time I've ever seen one of these. The result is that the total length of the file is 927 bp, and the file is identical. This article is about the confirmation of the discovery of the wrong part of the file. A party to the article, the article to the article, the article to the article. 2. The production and selection of the 4CL promoter (4CL1 and 4CL2) of the 4CL promoter are introduced into the 35S promoter of the 35S promoter and the xylem-specific display promoter connected to the downstream of the promoter in the direction of the promoter using the basic conversion system of the 4CL promoter (LBA4404). 13 individuals were selected for the final selection. The activity of 4CL was inhibited by 90% in six of the morphologically altered individuals. The activity of 4CL was inhibited by individual and total morphological changes, and the results of morphological change analysis showed that the activity of 4CL was inhibited by individual and total morphological changes, and the content of morphological change was inhibited by total and total morphological changes.