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腹腔洗浄液のテロメラーゼ活性測定による胃癌腹膜再発予備群の診断-マグネットビーズを用いた腫瘍細胞分離法による検討-

通过测量腹腔灌洗液中的端粒酶活性来诊断腹膜中胃癌的潜在复发 - 使用磁珠分离肿瘤细胞方法的研究 -

基本信息

批准号：
10770613
负责人：
吉野茂文
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

腹腔内洗浄細胞診は古典的な癌細胞検出法であり、細胞診陽性と生存率の低さには正の相関が報告されている。しかしながら細胞診の検出感度は必ずしも高いとはいえない。そこで癌細胞に特異性の高いテロメラーゼ活性測定を、胃癌手術時に得られた腹腔内洗浄水中の癌細胞の検出に応用した。従来のtelomeric repeat amplification protocol(TRAP)assayでは早期癌の5検体中3検体に活性を認め、さらにリンパ球を多く含んだ肝硬変患者の腹水中にも強い活性を認めた。末梢血単核球1×10^4からも明らかに活性が認められたことより、これらの陽性反応は検体中のリンパ球に由来するものと考えられた。そこで上皮細胞に特異的に結合するimmunomagnetic beadsで検体を処理し、リンパ球を除去した後にTRAP assayを行う方法(ビーズ法)を考案した。基礎的検討では末梢血単核球1×10^5においても活性を検出せず、一方、KATO-III10個相当の活性は検出可能であった。ビーズ法を用いた臨床検体の測定では漿膜下浸潤以深の20検体中10検体が陽性であり、粘膜〜筋層浸潤の14検体は全例陰性であった。細胞診は漿膜下浸潤以深の20検体中9検体が陽性であった。当測定法はリンパ球の混入している少数の癌細胞の検体のテロメラーゼ活性測定には従来法に比し信頼性が高く、また細胞診と比し客観性という観点から優れた検査法である。

The correlation between the classical method of detecting cancer cells and the low survival rate of positive cytodiagnosis was reported. The sensitivity of cellular diagnosis must be high. The activity of cancer cells in peritoneal lavage was determined by ELISA. The recent telomeric repeat amplification protocol(TRAP)assay has identified activity in 3 of 5 early stage cancers, including ascites in patients with cirrhosis. 1×10^4 of the peripheral blood nuclei were identified by the activity of the cells. The TRAP assay was developed for the treatment of epithelial cell-specific immune beads. The basic model is 1×10^5 cells, and the activity model is 1×10^5 cells. KATO-III has 10 cells. The subserous infiltration was detected in 10 out of 20 samples, and the mucosa-muscular infiltration was detected in 14 samples. The cells were found to be subserous with deep infiltration in 9 out of 20 cells. When the assay is mixed with a small number of cancer cells, the activity of the assay is higher than that of the previous assay. When the assay is mixed with a small number of cancer cells, the activity of the assay is higher than that of the previous assay.