抗糖鎖抗体ST421によるアポトーシス誘導に関する検討

抗聚糖抗体ST421诱导细胞凋亡的研究

• 批准号: 10770626
• 负责人: 一色 聡一郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770626/
• 关键词: Apotosis; Lewis antigen; ST-421; Galactosyltransferase; 糖鎖抗原; アポトーシス

腫瘍関連糖鎖抗原の一つであるdimeric Lewis a抗原を認識するST421は、dimeric Lewis a抗原陽性細胞株である。Colo205細胞株に対し、in vitroおよびin vivoにおいて抗体単独で殺細胞性を示す。われわれはこの作用がアポトーシス誘導によるものであること、またインターフェロンγによりこの作用が増強されることを示した。さらに、本抗原を合成する新規ガラクトース転移酵素β3Gal-T5をdegenerate PCR法によりクローニングし、本酵素が(1)消化管上皮においてdimeric Lewis a抗原を含むルイス1型抗原を合成する酵素であること、(2)dimeric Lewis a抗原の量を決定していること、(3)dimeric Lewis a抗原陰性細胞株であるHCT-15が本遺伝子の導入により細胞表面に本抗原を発現することを確認した。また、大腸正常および癌組織における発現を、新鮮凍結標本より抽出したRNAより合成したcDNAを用い、定量的PCR法(competitive RT-PCR method)により定量したところ、本酵素の転写産物量は癌組織において有意に低下していた。そこで、発癌による本酵素の発現低下機構を解明するため、本酵素の転写領域の解析を行った。ヒトゲノムライブラリーより本遺伝子の転写調節領域をクローニングし、種々の長さの欠失変異体を作成し、ルシフェラーゼアッセイを行ったところ、転写開始点の上流約200塩基近傍に主要な転写調節領域が存在することが判明した。また、この部位をプローブとしてゲルシフトアッセイを行い、転写調節因子の同定を試みている。

One of the tumor associated sugar lock antigens is dimeric Lewis a antigen. ST421 and the dimeric Lewis a antigen positive cell line are recognized. Colo205 cell line, both in vitro and in vivo The purpose of this article is to enhance the quality of the product. (1) dimeric Lewis a antigen in digestive tract epithelium;(2) enzyme for synthesis of dimeric Lewis a antigen; and (3) determination of the amount of dimeric Lewis a antigen.(3)dimeric Lewis a-antigen negative cell line HCT-15 was confirmed to express this antigen on the cell surface after introduction of this gene. The expression of RNA in normal and cancerous tissues of the large intestine was determined by competitive RT-PCR method. The mechanism of low expression of this enzyme in the development of cancer is explained. The analysis of the domain of this enzyme is performed. It was found that there was a main writing regulation field about 200 degrees upstream of the writing start point, and that there was a main writing regulation field about 200 degrees upstream of the writing start point. In addition, the adjustment factors of the three parts of the body are also determined.

项目成果

H.ISHIZUKA et.al.: "Antitumor activity of murine monoclonal antibody NCC-ST-421" Anticancer Res. 18(4A). 2513-2518 (1998)

H.ISHIZUKA 等人：“鼠单克隆抗体 NCC-ST-421 的抗肿瘤活性”Anticancer Res。

Isshiki S et al.: "Cloning expression, and characterization of a novel UDP-galactose:β-GlcNAc β1,3-galactosyltransferase (β3Gal-T5)responsible for synthesis of type 1 chain in colorectal and pancreatic epithelia and tumor cells derived therefrom"J Biol Ch

Isshiki S 等人：“新型 UDP-半乳糖：β-GlcNAc β1,3-半乳糖基转移酶 (β3Gal-T5) 的克隆表达和表征，负责结直肠和胰腺上皮以及由此衍生的肿瘤细胞中 1 型链的合成”生物杂志。

Ishizuka H et al.: "Antitumor activity of murine monoclonal antibody NCC-ST-421 on human cancer cells by inducing apoptosis"Anticancer Res. 18(4A). 2513-2518 (1998)

Ishizuka H 等：“鼠单克隆抗体 NCC-ST-421 通过诱导细胞凋亡对人类癌细胞的抗肿瘤活性”Anticancer Res。

S.ISSHIKI et al.: "Cloning,expression and characterization of a novel UDP-galactose:GlcNAc β1,3 galactosyl transterase" J.Biol.Chem.(in press). (1999)

S.ISSHIKI 等人：“新型 UDP-半乳糖：GlcNAc β1,3 半乳糖基转移酶的克隆、表达和表征”J.Biol.Chem.（出版中）。