下垂体腫瘍関連チロシンキナーゼ遺伝子のクローニングと機能解析

垂体瘤相关酪氨酸激酶基因的克隆及功能分析

• 批准号: 10770682
• 负责人: 笠 伸年
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770682/
• 关键词: 下垂体腺腫; 下垂体癌; チロシンキナーゼ遺伝子; c-met

下垂体腺腫、下垂体癌及び正常下垂体の各々の組織よりRNAを抽出。チロシンキナーゼ型遺伝子のキナーゼドメインにおけるコンセンサス配列を利用しdegenerated primerを作成して、RT-PCRを施行。RT-PCR産物をベクターに組み込み、トランスフォーメーションした後に、各々について約100クローンをクローニングした。約200塩基の部分配列をシークエンスし、塩基配列を決定。ホモロジー検索にて発現を認めるチロシンキナーゼを同定した。新たなチロシンキナーゼ型遺伝子は発見されなかったものの、下垂体腺腫での発現が報告されていない遺伝子が同定された。正常下垂体と下垂体腺腫に共通して発現を認めたものとしてはIGF1R,Tie-1,JAK1,FAKなどがあり、一方HEKfamily,EGFR,FGFR,pdgfR(a,b),c-metなどは下垂体腺腫においてのみ発現を認めた。下垂体腺腫の手術や病理解剖で得られた組織標本を用いて、免疫組織学的手技を利用し、組織内発現を評価した。上記のチロシンキナーゼ型受容体のうち、c-metでは有意差をもって下垂体癌においての高度陽性を認め、悪性化への関与が示唆された。c-met遺伝子の突然変異・再配列の検討を行ったが異常は指摘されなかった。c-metに対するリガンドであるHGFの負荷試験をラット下垂体腺腫細胞株を用いたin vitro assayを施行したところ、増殖また浸潤の促進が有意に認められ、下垂体腺腫における増殖・浸潤にc-metを介するsignal transductionの関与が示唆された。

Each tissue of pituitary adenoma, pituitary cancer and normal pituitary gland is extracted and RNA is extracted. degenerated Primer was created and RT-PCR was carried out. RT-PCR Products It costs about 100 クローンをクローニングした. Approximately 200 pieces of base will be allocated to the base and the base will be selected.ホモロジー検SO にて発appearsをcognizeめるチロシンキナーゼを同定した.新たなチロシンキナーゼtype 缝子は発见されなかったものの, The report of the appearance of pituitary adenoma is the same as the report. Normal pituitary gland and pituitary gland adenoma are common and common. IGF1R, Tie-1, JAK1, FAK, one side HEKfamily, EGFR, FGFR, pdgfR (a, b), c-metなどは pituitary adenoma に お い て の み発 appear を cognize めた. The surgical procedures for pituitary adenoma include the use of pathological anatomy and the use of tissue specimens, the use of immunohistological techniques, and the evaluation of intra-tissue findings. The above mentioned のチロシンキナーゼ type receptor のうち, c-met では intentional difference をもっThe diagnosis of pituitary gland cancer is highly positive, and the diagnosis and treatment of pituitary gland cancer are related. c-met's sudden change of the child's body and rearrangement of the row are abnormal and abnormal. c-met HGF stress test using pituitary adenoma cell line in vitroをexecutionしたところ、proliferationまたinfiltrationのpromotionがintentional recognitionめられ、pituitary gland swellingにおけるproliferation·infiltrationにc-metを Introductionするsignal Transductionの关与が时憆された.