糖尿病網膜症におけるグリケーション後期反応産物(AGEs)に関する研究

糖尿病视网膜病变晚期糖基化反应产物（AGEs）的研究

• 批准号: 10770947
• 负责人: 澤 浩
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770947/
• 关键词: AGE; 糖尿病網膜症; 網膜組織; 硝子体; トルイジンブルー染色; tight junction; マイクロシリンジ

本研究の目的は、明らかにされつつある種々のAGEsの作用を、網膜組織レベルで調べることにある。昨年度実験系をもとに。糖尿病を自然発症し、100%に糖尿病白内障を呈するGKラットを用い、bovine serum albumin(BSA)とAGEをインキュベートして作成した50mg/mlAGEs-BSAを直接硝子体腔内に注入し、その後の網膜血管の変化を観察した。注入には試行錯誤の結果さらに細いマイクロシリンジを用いることにした。実験を繰り返したところ、normalラットと同様に一回の投与では糖尿病性の変化は検眼鏡的、蛍光眼底造影でも観察されなかった。持続的な高濃度のAGEsが硝子体中に必要と判断し、3日毎に硝子体注入を施行した。各ラットにつき約3週間程度注入を続けた。注入毎に観察したが糖尿病性の変化は検眼鏡的には網膜出血などの糖尿病網膜症と考えられる所見は認めなかったが、蛍光眼底造影では網膜血管からの漏出が観察された。繰り返し投与は組織侵襲も大きく、投与方法の変更の必要性を痛感した。今後は硝子体内にAGEsを含んだマイクロスフェアーを強膜創から注入し持続的にAGEsを放出する方法も試みようと考えている。組織学的検討として眼球摘出を行い2.5%グルタールアルデヒド含有0.1Mリン酸緩衝液にて眼球を浸漬固定した網膜部位を切り出し、一部はプラスチック包理(JB-4)後、約1μmの切片とし、トルイジンブルー染色を施した。組織的に明らかな糖尿病性変化は観察できなかったが網膜浮腫などの以上を示す所見が認められた。また一部はエポキシン樹脂に包埋後超薄切し透過電子顕微鏡を用いて観察では血管内皮細胞、壁細胞などのtight junctionの異常が観察された。

The purpose of this study is to investigate the role of AGEs in the development of retinal tissue. Last year's game was on the line. Diabetes mellitus naturally develops, 100% of diabetes mellitus cataracts appear, GK serum albumin(BSA) and AGE are produced, 50mg/ml AGEs-BSA is injected directly into the body cavity, and the retinal blood vessels are observed later. Inject error into the file. The same goes for normal and diabetic ophthalmography. It is necessary to judge the high concentration of AGEs in the nitrate, and the nitrate injection is carried out every 3 days. Each injection takes about 3 weeks. Injections and examinations of diabetic retinopathy and diabetic retinopathy It is necessary to change the way of investment and organization. In the future, AGEs will be injected into the body and released. Histological examination: The eyeball was extracted and fixed in a buffer containing 0.1M hydrochloric acid. The retina was cut out, one part was wrapped in JB-4, and about 1μm sections were cut and stained. The symptoms of diabetes mellitus were observed in the retina edema. The ultra-thin sections of the blood vessel endothelial cells and parietal cells embedded in the resin were observed by electron microscopy.