P.gingivalis短線毛の遺伝子クローニングとその機能に関する研究

牙龈卟啉单胞菌短菌毛基因克隆及其功能研究

• 批准号: 10771006
• 负责人: 浜田 信城
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771006/
• 关键词: (1)Porphyromonas gingivalis; (2)線毛; Porphyromonas gingivalis; 線毛

歯周炎の原因菌とされているPorphyromonas gingivalisの菌体表層には、線状構造物である線毛(fimbriae)が存在している。申請者は、線毛遺伝子を不活化することにより主要構成タンパク質(fimbrillin,FimA)である41kDaタンパク質を発現しない変異株(fimA mutant)を作製し、電子顕微鏡観察を行ったところ、親株に存在する長い線毛構造物の消失が確認されるとともに41kDa線毛と比較すると細く、短い線毛構造物の存在が認められた。分離した短線毛のSDS-PAGEによる推定分子量は67kDaで、Western blotting法において41kDa線毛タンパク質とは抗原性が異なっていた。また、Immunogold法により本67kDa線毛は、fimA mutantだけでなく親株にも存在することが明らかになった。尚、N-末端アミノ酸配列から、この線毛は従来、膜タンパク質として報告されているものと同一であることが判明した。さらに、T7プロモーターを用いた大腸菌の系でタンパク質発現を行った結果、クローニングされたDNA断片上に67kDa線毛タンパク質をコードする遺伝子の存在が確認された。以上の結果からPorphyromonas gingivalisの菌体表層には、2種類の線毛が発現していることが明らかになった。今後、本遺伝子を不活化することにより、67kDa線毛を発現しない変異株を作製し、歯周炎における67kDa線毛の役割および41kDa線毛との係わりを明らかにする予定である。

The bacteria that cause periodontitis, the bacteria that cause periodontitis, the Porphyromonas gingivalis bacteria, the bacteria surface, the creations, the hairs (fimbriae), the hairs, the hairs. Those who applied for the money and those who applied for it did not activate it. They mainly became fimbrillin. FimA) do not use the 41kDa to detect the presence of fimA mutant, the presence of long hair, the disappearance of long hair, the loss of hair, and the existence of short hair, short hair, and short hair. The molecular weight was presumed to be 67kDa by SDS-PAGE method, and the antigenicity was determined by Western blotting method. In this 67kDa test, Immunogold method and fimA mutant method, there is a significant difference between the two groups. In addition, the N-terminal equipment is equipped with acid, the hair is used, and the membrane is used to report that it is the same as before. The results show that there is a 67kDa hair on the DNA fragment, and that there is a confirmation that there is a bug in the DNA fragment. The above results show that the Porphyromonas gingivalis bacteriological table is very sensitive, and the results show that there is no significant difference between the two groups. From now on, we will not activate your hair, 67kDa hair will show that your plant will be used as a tool, and your hair will be cut in the form of 41kDa hair, 41kDa hair, and so on.