歯の形成過程におよぼす放射線の作用（培養象牙芽細胞を用いた実験）

辐射对牙齿形成过程的影响（使用培养的成牙本质细胞进行的实验）

• 批准号: 10771036
• 负责人: 田谷 あつ子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771036/
• 关键词: 放射線影響; 象牙芽細胞様細胞; ラット; アルカリフォスファターゼ; 石灰化

培養象牙芽細胞様細胞の分化に及ぼす放射線の影響を検討する実験を行った。実験に用いた未分化な象牙芽細胞様細胞は、6週令同腹ラットの切歯歯髄を摘出して細切後に酵素処理により細胞を遊離させて分離し、10%FBSを含むα-MEM培養液を用いて培養した。1継代目の細胞をマルチウェルプレートに播いて培養し、4MVエックス線を照射して、細胞の分化と増殖に及ぼす放射線の作用を検討した。照射量は2、4および8Gyとし、コントロールには非照射の細胞を用いた。細胞の分化の指標として、アルカリフォスファターゼ(ALPase)活性を呈色反応により測定した。分化した細胞による石灰化した骨様結節の形成はvon Kossa染色を行って定性的に評価し、沈着したカルシウム(Ca)量の定量はカルシウムCテストを用いて比色定量した。ALPase活性は、培養日数の経過に伴って増加したが、石灰化が進んだ時期には低下した。細胞がサブコンフルエンスの時期に照射して培養を続けると、照射後7日目のALPase活性およびカルシウム量は、照射群とコントロール群を比較して差が認められなかった。細胞がコンフルエンスの時期に照射すると、照射後6日目のカルシウム量は照射群とコントロール群で差がみられなかった。これらの結果から、これまでに検討した条件においては、エックス線の作用は細胞の分化を阻害しないことが示唆された。しかし、細胞の分化の程度が異なる時期に照射すると照射の影響が異なると考えられるために、更に検討を行っている。さらに、放射線による細胞死の機序として、アポトーシスの誘発が考えられる。そこで、放射線照射後の細胞核の断片化、DNA断片化を調べ、アポトーシスの検討を行っている。

The differentiation of cultured ivory bud cells and the effects of radiation were investigated. The undifferentiated ivory bud cells are harvested from undifferentiated ivory bud cells and fermented after 6 weeks of harvesting from the same abdomen. The cells were free and isolated after treatment with 10% FBS, and cultured in α-MEM culture medium containing 10% FBS. 1継代目's cell cultured cells, 4MV cells The effects of ray irradiation, cell differentiation and proliferation, and the effects of radiation are all important. The irradiation dose is 2, 4, 8Gy, and コントロールには non-irradiated cells. Indicators of cell differentiation are the measurement of ALPase activity and color reaction. Differentiation of cells and formation of calcification of bone nodules Kossa dyeing is a qualitative evaluation of the color, and a colorimetric and quantitative method of the colorimetric dyeing (Ca) is used. ALPase activity has increased over the number of days of culture, and has decreased during the period of calcification. The cells were cultured during the irradiation period and ALPAS was performed 7 days after irradiation. eActive active ingredients, irradiation group, relatively poor quality, and irradiation group. Cell irradiation period and 6 days after irradiation period The amount of ルシウムは irradiation group とコントロールgroup で difference がみられなかった.これらのRESULTから、これまでに検问したconditionsにおいては、エThe function of the ックス line is to hinder the differentiation of cells and to instigate it.しかし、The degree of differentiation of cells is different and the period of irradiation is different.さらに、radiation による Mechanism of cell death として、アポトーシスのinducing発が考えられる.そこで, fragmentation of cell nuclei after irradiation, fragmentation of DNA, を Adjustment, アポトーシスの検検を行っている.