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ヒト好酸球性前駆細胞株の樹立と好酸球顆粒蛋白質の遺伝子制御機序の解析

人嗜酸性粒细胞祖细胞系的建立及嗜酸性粒细胞蛋白基因调控机制分析

基本信息

批准号：
10771276
负责人：
日塔武彰
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Yamagata University (1999)Tohoku University (1998)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

Interleukin-5(IL-5)による好酸球顆粒蛋白質の発現制御の機構を解析するために、ヒトIL-5受容体のα鎖をEoL-1細胞に強制発現させることを試みた。ヒト骨髄細胞由来のmRNAをtemplateとして、IL-5受容体α鎖のcDNAをRT-PCR法によって増幅した後、発現プラスミドに組み込み、electroporation法によってEoL-1細胞にtransfectしたが、安定にIL-5受容体α鎖を発現するtransformantを得ることができなかった。発現ベクター、transfectionの条件、スクリーニングの方法など条件を変更して検討を行ったが、最終的にはtransformantを得ることができなかった。そこで、ラットの骨髄細胞を用いて好酸球顆粒蛋白質の発現機構を検討した。ラットIL-5のcDNAをカイコに強制発現させ、カイコ体液よりリコンビナントラットIL-5を精製し、大量のリコンビナントIL-5を得た。この精製リコンビナントラットIL-5を用いてラット骨髄細胞の好酸球への分化に伴う好酸球顆粒蛋白質の発現について解析を行った。ラットの骨髄細胞を調製し、一定期間リコンビナントラットIL-5存在下で培養したところ、培養2日後からmajor basic protein(MBP)のmRNAレベルが、また培養3日後から細胞内のMBP蛋白質量が経時的に増加した。また、この上昇は、dexamethasoneによって抑制されたことから、glucocorticoidに感受性のあるシグナルを介していることが明らかになった。

Interleukin-5 (IL-5) is responsible for the determination of acid globulin by the monitoring machine, and the IL-5 receptor alpha EoL-1 cell is used to force the detection of acid globulin test. The cause of the disease was mRNA, template, cDNA, RT-PCR, electroporation, electroporation, EoL-1, IL-5, IL-5, transformant, transformant, and so on. The transfection conditions, the conditions, the conditions. The cells of the bone marrow and the bone marrow cells were treated with good acid globulin and the mechanism was used. The IL-5, cDNA, and so on, the body fluids, the body fluids, the IL-5 sperm, the IL-5 sperm, the IL-5, the IL-5. The cells of IL-5 were separated from bone cells, acid globule, differentiation, granulin, bone marrow, bone, bone, After incubation for 2 days, major basic protein (MBP) and mRNA after incubation for 2 days and 3 days after incubation, the concentration of MBP protein in the cells was increased. This is the first time you have heard that, and that the dexamethasone has suppressed the sensitivity, the sensitivity and the sensitivity.