アポトーシス細胞における膜リン脂質変動とそれに関与するホスホリパーゼA＿2の解析

凋亡细胞膜磷脂波动及参与其中的磷脂酶A_2分析

• 批准号: 10771302
• 负责人: 厚味 厳一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771302/
• 关键词: アポトーシス; リン脂質; ホスホリパーゼA_2; 抗Fas抗体; カルシウム非依存性ホスホリパーゼA_2; トリアシルグリセロール

抗Fas抗体処理あるいはTNFおよびシクロへキシミド(TNF/CHX)処理によりアポトーシスを誘導したヒト単核球系白血病細胞株のU937細胞を用いて以下に示すことを明らかにした。1: あらかじめ放射標識オレイン酸あるいはパルミチン酸標識した細胞に抗Fas抗体処理でアポトーシスを誘導した結果、放射標識アラキドン酸標識した細胞と同様に脂肪酸遊離量の増加が観察された。この脂肪酸遊離量の増加は、カルシウム非依存性ホスホリパーゼA_2(iPLA_2)の阻害剤であるmethyl arachidonylfluorophosphonate(MAFP)及びbromoenol lactoneにより阻害された。これらのことより、脂肪酸遊離へのiPLA_2の関与が強く示唆された。2: あらかじめ放射標識アラキドン酸で標識した細胞をTNF/CHX処理によりアポトーシスを誘導すると、主にトリアシルグリセロール量の増加が観察された。この増加は予想外にもMAFPにより抑制されたが、その阻害様式については現在のところ不明である。また、わずかながら観察された遊離脂肪酸量の増加もMAFPで抑制され、TNF/CHX処理細胞においても脂肪酸遊離の増加にiPLA_2が関与することが示唆された。3: 両系において、アポトーシス誘導時にMAFPを共存させると、アポトーシス初期段階(6時間まで)での細胞死が遅れた。しかし、caspase-3活性やDNAの断片化は影響を受けなかった。

Anti-Fas antibody treatment of TNF-α and TNF-α in human leukemia cell line U937 1. The increase in free fatty acid content in cells treated with anti-Fas antibodies was observed. The increase of free fatty acid content was due to the inhibition of methyl arachidonylfluorophosphate (MAFP) and bromoenol-lactone by the independent inhibitor of A_2(iPLA_2). The relationship between fatty acid free radical and iPLA_2 and strong radical is discussed. 2. Increased levels of TNF/CHX treatment in cells were observed. This increase is due to the fact that MAFP is not available, and that it is not available. The increase of free fatty acids in TNF/CHX-treated cells was observed, and MAFP was inhibited. 3: MAFP co-exists in the middle of the system and in the early stage of the system (6 hours). Caspase-3 activity and DNA fragmentation are affected by this phenomenon.

项目成果

Gen-ichi Atsumi et.al: "Fas-induced Arachiclonic acid release is mediated by Ca^<2+>-incleperdent phosphohpaseA_2 but not cytosolic phospholipaseA_2 which undergoes protedytic inactivation" The Journal of Biological Chemistry. 273. 13870-13877 (1998)

Gen-ichi Atsumi等人：“Fas诱导的花生四烯酸释放是由Ca^2-不正常的磷酸酶A_2介导的，而不是经历蛋白水解失活的胞质磷脂酶A_2介导的”生物化学杂志。

Gen-ichi Atsumi et.al: "The perturbed membram of cells undergoing apoptosis is susceptible to type II secretory phosphohpaseA_2 to liberate arachidonic acid" Biochimica et Biophysica Acta. 1349. 43-54 (1997)

Gen-ichi Atsumi 等人：“经历凋亡的细胞膜受到干扰，容易受到 II 型分泌性磷酸酶 A_2 的影响，从而释放花生四烯酸”Biochimica et Biophysicala Acta。

厚味 厳一 他: "Fasにより誘導されたアポトーシス細胞における膜リン脂質代謝の変動" 第19回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム講演要旨集. 294-295 (1997)

Genichi Atsumi 等人：“Fas 诱导的凋亡细胞中膜磷脂代谢的变化”第 19 届生物膜-药物相互作用研讨会摘要 294-295（1997）。

厚味 厳一 他: "アポトーシスに伴う細胞質ホスホリパーゼA_2限定分解の解析" 脂質生化学研究. 39. 53-55 (1997)

Genichi Atsumi 等人：“与细胞凋亡相关的细胞质磷脂酶 A_2 的有限降解分析”Lipid Biochemistry Research 39. 53-55 (1997)。

厚味 厳一: "アポトーシス細胞における脂質代謝変動について" 脂質生化学研究. 40. 298-299 (1998)

Genichi Atsumi：“关于凋亡细胞中脂质代谢的变化”Lipid Biochemistry Research 40. 298-299 (1998)。