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Elucidation of the effect of extracellular stearic acid on intracellular transport

阐明细胞外硬脂酸对细胞内运输的影响

基本信息

批准号：
21K05427
负责人：
厚味厳一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05427/
关键词：
ステアリン酸リン脂質細胞内輸送 Akt GLUT4 脂肪酸脂肪細胞細胞膜

项目摘要

細胞外のステアリン酸の濃度変動が、細胞内の小胞輸送に与える影響を明らかにすることを目指してる。2022年度では、研究を進める上で鍵となる細胞内の小胞輸送の可視化に向けて検討した。AKTタンパク質に緑色蛍光タンパク質EGFPが付加されたタンパク質を発現するプラスミドベクターを作成し、細胞内のAKTタンパク質を可視化するツールを得た。また、遺伝子導入が困難である脂肪細胞に対して遺伝子導入条件を検討し、導入効率を高めることが出来た。次に、ステアリン酸がどのように細胞内輸送に関わるのかを明らかにするために、細胞内のステアリン酸量とインスリン応答性との関係を調べた。その結果、細胞外のステアリン酸濃度が継続的に高まることで、細胞内のステアリン酸の含有量が高まるだけではなく他の脂肪酸の含有量にも変化が生じ、その変化とインスリン応答性低下とのタイミングが一致することが分かり、ステアリン酸以外の脂肪酸の細胞内における変動にも着目する必要があることが明らかになった。さらに、ステアリン酸と立体構造が類似しているが二重結合を分子内に有するバクセン酸を用いて検討したところ、細胞外のステアリン酸の濃度を高めた時とは異なり、インスリン応答性は低下しなかった。この結果からも、単に細胞内でステアリン酸のような脂肪酸が増えただけではインスリン応答性が低下しない、すなわち細胞内輸送が影響を受けないことを示唆しており、ステアリン酸以外の脂肪酸の含有量の変化も併せて総合的に解析を進めていく必要性が強く示唆された。

Changes in the concentration of extracellular acids, intracellular vesicle transport and other effects In 2022, the key to further research is to visualize intracellular cellular transport. AKT cell quality green light EGFP can be added to the cell quality display, and AKT cell quality can be visualized. It is difficult to introduce gene into adipose cells. The conditions for introducing gene are discussed. The introduction efficiency is high. The relationship between intracellular acid transport and intracellular acid transport is regulated. As a result, extracellular fatty acid concentrations are higher, intracellular fatty acid concentrations are higher, and intracellular fatty acid concentrations are lower. In addition, the three-dimensional structure of the compound is similar to that of the compound in the molecule, and the concentration of the compound in the cell is different from that in the molecule. As a result, intracellular fatty acid content increases, cellular responsiveness decreases, and intracellular transport is affected. The change in the content of fatty acids other than fatty acids and the need for integrated analysis are strongly demonstrated.