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植物防御機構に関わる有用な二次代謝産物生合成遺伝子群の解析

与植物防御机制相关的有用次生代谢物生物合成基因分析

基本信息

批准号：
10771329
负责人：
稲垣喜茂
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771329/
关键词：
ジヒドロフラボノール4-還元酵素カルコン合成酵素アサガオマルバアサガオイネフェニルプロパノイドベンツォキサジノン二次代謝産物 semi-fuantitative RT-PCR アントシアニンフアイトアレキシン

项目摘要

本研究は、植物防御機構に関わる有用な二次代謝産物(フェニルプロパノイドやベンツオキサジノンなど)の生合成遺伝子群について、1)フェニルプロパノイド生合成経路、CHS(カルコン合成酵素)・DFR(ジヒドロフラボノール4-還元酵素)両遺伝子に注目し、2)ベンツオキサジノン生合成経路では、トリプトファン合成酵素α、チトクロームP-450依存性モノオキシゲナーゼなどの遺伝子群(bx1からbx5)に注目して、それぞれの生合成に関わる酵素群の遺伝子構造や生化学的機能、遺伝子発現様式について解析することを主たる研究の目的とする。1)昨年度では、DFR-A、-B、-C、と3つタンデムに並ぶアサガオ及びマルバアサガオのアントシアニン生合成経路遺伝子DFRについて遺伝子構造解析を行ったところ、これらDFR遺伝子はアサガオとマルバアサガオの種分化が起る以前に非相同的組換えにより3コピーのDFR遺伝子がタンデムに並んだ構造となり、その後挿入や欠失を含む多様化が起ったことを示唆していた。本年度では、マルバアサガオCHS遺伝子群(CHS-D、CHS-E)について大腸菌内において発現を試み、生化学的な解析を行った。その結果、CHS-D、CHS-Eの両遺伝子産物共に、ナリンゲニンカルコンを作り出す活性を保持していた。2)つぎに、栽培種イネ12種及び野性種イネ25種類について発芽時でのベンツオキサジノン産生の有無をFeC13をもちいた青色呈色反応により検討を試みた。その結果、これらのうちの2種類(O. officinalis, O. alta)において、呈色反応陽性を示すものがあった。しかしこれらについてHPLC分析を試みたところ、どちらの野性種イネにおいても、HIBOA,DIBOA,DIMBOAと考えられるようなピークは検出されなかった。現在、トウモロコシのbx遺伝子群のイネヘの導入を目指し、RT-PCRを用いてトウモロコシbx遺伝子群(bx1からbx5)のクローニングを試みている。

In this study, plant defense institutions have been involved in the production of useful secondary metabolites, including synthetic subgroups, 1) synthetic pathways, CHS (synthetic enzymes), DFR (synthetic enzymes, 4-isozymes), and so on. 2) the production of synthetic enzymes is very important in the production of synthetic pathways, the expression of synthetic enzymes α, the dependence of enzyme subgroups (bx1 bx5) on the synthesis of enzymes, the production of enzymes, the mechanism of biochemistry, the analysis of the formula, the analysis of the main purpose of research. 1) Last year, DFR-A,-B,-C, 3-year-old, high-speed, high-speed, high-speed, In the past, the same system was not the same as before. In the past, the DFR system was not the same. In the past, it was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. In the past, the system was not the same as before. This year, the CHS subgroup (CHS-D, CHS-E) has been used to analyze the biochemical characteristics of the bacteria. The results showed that CHS-D and CHS-E were in common, and the activity was kept in good condition. 2) the FeC13, cultivated species, 12 species, and wild species, 25 species, and the wild species, 12 species, 12 species, and 25 species of wild species, 12 species and 25 wild species. The results show that there are significant differences between the two categories (O. officinalis, O. alta), and the color reversal shows that there are significant differences. The HPLC analysis, the wild, the wild, the HIBOA,DIBOA,DIMBOA, the baby, the girl, the girl, the Now, please click the bx subgroup to enter the target, and the RT-PCR to use the bx1 subgroup (bx1 bx5) to find the target.