权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

放線菌のカルコン合成酵素様遺伝子を用いたフラボノイド醗酵生産の基盤研究

放线菌类查尔酮合酶基因发酵生产黄酮类化合物的基础研究

基本信息

批准号：
11876018
负责人：
堀之内末治
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

放線菌Streptomyces griseusからクローニングしたrppA遺伝子は、植物のフラボノイド化合物合成の鍵となるカルコン合成酵素に似た蛋白をコードしている。N端末側にヒスチジンタグを付加した融合蛋白を大腸菌で大量に生産させたところ、約40kDaのホモダイマーであった。本酵素は、マロニルCoAをスターターおよび伸長ユニットとして5分子縮合させ、環状化、脱炭酸を伴って、1,3,6,8-テトラヒドロキシナフタレン(THN)を生成する新規なポリケチド合成酵素であることが判明した。また基質特異性を検討したところ、メチルマロニルCoAやその他いくつかのCoA化合物をスターターとすることが明らかとなった。rppA遺伝子を破壊すると、菌糸特有のメラニン色素が消え、いわゆる「アルビノ」形質を示した。従って、rppA酵素は、マロニルCoAからTHNを生成し、このTHNがメラニンの前駆体となると予想された。rppA遺伝子は多くの放線菌に分布しており、その近傍にp-450遺伝子を伴っていた。このP-450遺伝子を破壊すると、フラビオリンと同定された赤色色素が蓄積した。フラビオリンはTHNから自動酸化で生成されると考えられるため、rppAとP-450遺伝子が対となって放線菌全般のメラニン色素合成を担うことが示された。

Actinomycetes Streptomyces griseusからクローニングしたrppA伝子は、PlantのフラボノThe key to synthesizing the compound is the となるカルコン synthesis enzyme and the にsimilar protein をコードしている. The N-terminal end of the fusion protein is a fusion protein of Escherichia coli, which is produced in large quantities and is about 40kDa in size. This enzyme contains 5 molecular condensation, cyclization, decarboxylation, and 1, 3,6,8-Typical テトラヒドロキシナフタレン(THN)をGeneration new rule なポリケチド synthetic enzyme であることが clarificationした.またstroma-specific を検多したところ、メチルマロニルCoAやそのTAいくつかのCoA compound をスターターとすることが明らかとなった. rppA 缝子を波壊すると, fungi-specific のメラニン pigment が eliminate え, いわゆる「アルビノ」morphological quality をshow した.従って, rppA enzyme は, マロニルCoA からTHNをgeneration し, このTHN がメラニンの前槆体となると yu want された. rppA 伝子は多くのactinomycete に DISTRIBUTION しており、そのNearly にp-450 伝子を companion っていた.このP-450 缝子を波壊すると, フラビオリンと同定されたred pigment が综合した.フラビオリンはTHNからautomatic acidification and generation されると卡えられるため、rppAとP -450 缝子が対となってactinomycetes all kinds of のメラニン pigment synthesis を聆ことが Show された.