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膜結合型アミノペプチダーゼファミリーに属する新規酵素類の生理的役割の解明

阐明属于膜结合氨肽酶家族的新型酶的生理作用

基本信息

批准号：
11740463
负责人：
松本英子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

妊婦血中の酵素、胎盤性ロイシンアミノペプチダーゼ(P-LAP、オキシトシナーゼ)は、オキシトシンレベルの調節を通じて妊娠の維持に働く。当グループが行ったcDNAクローニングにより、P-LAPはアミノペプチダーゼAやアミノペプチダーゼNなどと、一次構造上の相同性が高く、活性中心に亜鉛分子を共通してもつ一つのファミリーをなすことが示されるとともに、非妊娠時にも種々の組織で発現していることが判明し、多様な機能をもつことが示唆された。前年度の研究より、P-LAPはMet-エンケファリンやニューロキニンAなどの神経ペプチドをも分解することが判明し、脳・神経系においても重要な機能を担う可能性が示唆されたため、本年度はその解明を目指し、P-LAPの脳・神経系における発現について詳しく調べた。P-LAPタンパク質の発現は、ラット脳内の広い部域で神経細胞のみに認められた。またラット培養神経細胞PC12では、分化に伴いP-LAPの発現が約2.5倍上昇した。この細胞でP-LAPは膜画分に存在し、免疫染色により神経突起および神経細胞体中にドット状のシグナルが確認されたため、ベシクルの膜に存在することが示唆された。またアデニル酸シクラーゼの活性化剤フォルスコリンによる刺激で、細胞表面P-LAPが約30%増加したため、P-LAPはフォルスコリン調節性ベシクルに存在すると考えられた。一方、ブレフェルジンA処理により細胞表面P-LAPは約二分の一に減少し、P-LAPが局在するベシクルはトランスゴルジネットワークに関与していることが示唆された。一方、同じファミリーに属し、P-LAPと特に相同性が高い脂肪細胞由来ロイシンアミノペプチダーゼは、組み換え型タンパク質にアンギオテンシン分解作用とキニン変換作用が認められ、腎臓の遠位尿細管および集合管に発現していたことから、血圧調節に関与している可能性が示唆された。

The levels of enzymes in the blood of pregnancy, pregnancy and pregnancy. When the cDNA and P-LAP devices were tested and tested, the same altitude was created at one time, and the active center molecules were used to detect the same temperature at one time. The multi-agent machine can be used to show that it is instigated. In the previous year, the P-LAP Met- information system was used in the study. In the previous year, the study was conducted in the first year. In the previous year, and in the previous year. In the previous year, in the study of the previous year, in the past year, in the previous year, in the past year, in the previous year, in the previous year, in the study of the previous year, and in the case of P-LAP in the past year, in the previous year, and in the current year. In the P-LAP system, you can see that you are in the area where you need to know. It was found that the number of PC12 cells was about 2. 5 times higher than that of differentiation, and that of differentiation and differentiation was about 2. 5 times higher than that of P-LAP. The presence of the P-LAP membrane, the presence of the protuberance, the protuberance, the presence of the cell body, the presence of the membrane, the presence of the membrane. In the presence of activation, cell surface P-LAP is about 30%, P-LAP is sensitive, and sexual activity is not detectable. On the one hand, the P-LAP on the cell surface is about two-thirds less, and the P-LAP bureau is saying that the cell surface is less than one-second. One party, the same family, the same family, the same as the P-LAP, the origin of the high fat cell, the blood cell, the blood cell, the tube, the tube, the collecting tube, the blood, the blood, the possibility.