植物における亜硝酸をアンモニアに還元する新規酵素遺伝子の解析に関する研究

植物中亚硝酸盐还原为氨的新型酶基因分析研究

基本信息

  • 批准号:
    11740446
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.45万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2000
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

亜硝酸還元酵素(NiR)は亜硝酸イオンをアンモニアに六電子還元する酵素で、植物が窒素源として取り込んだ硝酸イオンをアミノ酸にまで還元同化するのに必須の酵素の一つである。NiR cDNAのアンチセンス鎖を導入してNiR酵素活性を野生株の約5%にまで抑制したトランスジェニックタバコクローン271について硝酸還元能を^<15>Nを用いて調査した。亜硝酸還元能の測定はケールダール法により還元態窒素量を、同位体質量分析計により還元態窒素中に含まれる安定同位体比を測定し、両者の値から算出した。その結果、クローン271には野生株とほぼ同レベルの硝酸還元能が有ることが明らかになった。そこで、本研究ではクローン271において観察された硝酸還元能は何によるものなのか、すなわち、NiRとは異なる亜硝酸を還元する新規酵素を明らかにすることを目的として研究を行った。まず、葉および根についてNiR活性の測定を行った。クローン271の葉では野生株の葉で観察されるNiRの5%以下に減少していたが、クローン271の根では野生株の根で観察されるNiR活性とほぼ同レベルの活性値が観察された。そこで、硝酸還元能の測定を切り取り葉を用いて行った。約9週間生育させたクローン271および野生株から切り取った葉を1mM、20mM 50mM K15NO3溶液に浸して8時間おいた後、葉を洗浄、凍結乾燥、粉砕した後、硝酸還元能を測定した。その結果、切り取り用においてもクローン271において野生株とほぼ同レベルの硝酸還元能が観察された。次に、NiR以外に亜硝酸を還元する酵素が存在するか否かを検証するために、クローン271および野生株から抽出した粗抽出液をNativeゲルを用いた二次元電気泳動により分離、NiRの活性染色を行った。その結果、野生株では高い活性を持った2つのスポットと弱い活性を持った2つ以上のスポットが観察されたが、クローン271では活性が弱いスポットのみが観察された。現在これらのスポットのアミノ酸配列を解析中である。
亜 nitrate also yuan enzyme (NiR) は 亜 nitrate イ オ ン を ア ン モ ニ ア に six electronic yuan still す で る enzyme, plant が smothering element source と し て in り 込 ん だ nitrate イ オ ン を ア ミ ノ acid に ま で also yuan assimilation す る の に must の enzyme の つ で あ る. NiR cDNA の ア ン チ セ ン ス lock を import し て NiR enzyme activity を wild strains about 5% に の ま で inhibit し た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク タ バ コ ク ロ ー ン 271 に つ い て nitric acid can also yuan を ^ < 15 > N を with い て survey し た. 亜 determination of nitric acid can also yuan の は ケ ー ル ダ ー ル method に よ り yuan を smothering element quantity, also with a quality analysis meter に よ り smothering yuan states also contains に in ま れ る determination of stable isotopic body than を し, struck の numerical か ら calculate し た. そ の results, ク ロ ー ン 271 に は wild strains と ほ ぼ with レ ベ ル の nitrate there yuan can が る こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で, this study で は ク ロ ー ン 271 に お い て 観 examine さ れ た nitric acid can also yuan は what に よ る も の な の か, す な わ ち, NiR と は different な る 亜 nitrate を also yuan す る new rules enzyme を Ming ら か に す る こ と を purpose と し を line っ て research た. The NiR activity of まず, および of leaves and および of roots is determined by を rows and った. ク ロ ー ン 271 の leaf で は wild strains の leaf で 観 examine さ れ る NiR の below 5% に reduce し て い た が, ク ロ ー ン 271 の root で は wild strains の root で 観 examine さ れ る NiR active と ほ ぼ with レ ベ ル の active numerical が 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0 を で で, nitrate reductive energy <s:1> determination を cut take leaves を use そ て to った. About 9 weeks between birth さ せ た ク ロ ー ン 271 お よ び wild strains か ら cut り take っ た leaf を 1 mm and 20 mm to 50 mm に K15NO3 solution leaching し て 8 time お い た incorporated, leaf を, freeze drying, after powder 砕 し た after, determination of nitric acid can also yuan を し た. そ の results, cutting り take り に お い て も ク ロ ー ン 271 に お い て wild strains と ほ ぼ with レ ベ ル の nitric acid can also yuan が 観 examine さ れ た. Outside に, NiR に 亜 nitrate を also yuan す る enzyme が exist す る か no か を 検 card す る た め に, ク ロ ー ン 271 お よ び wild strains か ら spare し た crude extract を Native ゲ ル を with い た secondary yuan electric 気 swimming に よ り separation, NiR の line reactive dyeing を っ た. そ の results, wild strains で は high い activity を hold っ た 2 つ の ス ポ ッ ト と weakly い を hold っ た above 2 つ の ス ポ ッ ト が 観 examine さ れ た が, ク ロ ー ン 271 で は active が weak い ス ポ ッ ト の み が 観 examine さ れ た. Now in the である れら スポット スポット ア ア ノ ノ acid arrangement を analysis である.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Goslirma,N.: "Emission of nitrous oxide(N_2O) from transgenic tobacco expressing antisense NiR mRNA"The Plant Journal. 19(1). 75-80 (1999)
Goslirma,N.:“表达反义 NiR mRNA 的转基因烟草释放一氧化二氮 (N_2O)”植物杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Takahashi: "Nitrite reductase gene enrichment improves assimilation of nitrogen dioxide in Arabidopsis."Plant Physiology. (In press). (2001)
M.Takahashi:“亚硝酸还原酶基因富集改善了拟南芥中二氧化氮的同化。”植物生理学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
森川弘道: "環境汚染を食べる植物によるファイトレメディエーション"環境科学会誌. 12(4). 421-432 (1999)
Hiromichi Morikawa:“植物修复环境污染”,环境科学学会杂志 12(4) (1999)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
K.Shimizu: "Presence of an SAR-like sequence in junction regions between an introduced transgene and genomic DNA of cultured tobacco cells : its effect on transformation frequency."Plant Journal. (In press). (2001)
K.Shimizu:“在引入的转基因和培养烟草细胞的基因组 DNA 之间的连接区域中存在类似 SAR 的序列:其对转化频率的影响。”《植物杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
H.Morikawa: ""Phytoremediation : Transformation and Control of Contaminants""S.C.McCutcheon and J.L.Schnoor.
H.Morikawa:“植物修复:污染物的转化和控制”S.C.McCutcheon 和 J.L.Schnoor。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

高橋 美佐其他文献

高橋 美佐的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('高橋 美佐', 18)}}的其他基金

二酸化窒素による転写制御因子の翻訳後修飾を介した植物成長制御機序の解明
阐明二氧化氮转录调节因子翻译后修饰介导的植物生长控制机制
  • 批准号:
    22K05935
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
大気中活性窒素の細胞増殖バイタリゼーション作用の分子生理学的実態と分子種の解明
大气活性氮细胞生长活化作用的分子生理学和分子种类的阐明
  • 批准号:
    18770037
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
災害時地域支援を想定した小規模自立無線ネットワークの信頼性の研究
灾害时区域保障小规模独立无线网络可靠性研究
  • 批准号:
    17710140
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
活性窒素分子種によるニトロセイティブ・ストレスのプロテオミクス
活性氮物种亚硝化应激的蛋白质组学
  • 批准号:
    15710149
  • 财政年份:
    2003
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
マクロアレイを用いた植物の大気汚染ストレス応答遺伝子の解析
利用宏阵列分析植物空气污染胁迫反应基因
  • 批准号:
    13780454
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

相似海外基金

硫黄同化系を高効率化したトランスジェニック植物によるファイトリメディエイション
使用具有高效硫同化系统的转基因植物进行植物修复
  • 批准号:
    14704062
  • 财政年份:
    2002
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
硫黄同化系を高効率化したトランスジェニック植物によるファイトリメディエイション
使用具有高效硫同化系统的转基因植物进行植物修复
  • 批准号:
    12780415
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
硫黄同化系を高効率化したトランスジェニック植物によるファイトリメディエイション
使用具有高效硫同化系统的转基因植物进行植物修复
  • 批准号:
    11771479
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
マラリア原虫に対するトランスジェニック植物ワクチンに関する研究
抗疟原虫转基因植物疫苗的研究
  • 批准号:
    11147227
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
トランスジェニック植物を用いた小胞体分子シャペロンの機能解析
使用转基因植物进行内质网分子伴侣的功能分析
  • 批准号:
    09276218
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ウイルス病抵抗性トランスジェニック植物の媒介虫伝搬に対する抵抗性に関する研究
抗病毒病转基因植物抵抗病媒传播的研究
  • 批准号:
    07920010
  • 财政年份:
    1995
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (B)
トランスジェニック植物を用いた細胞系譜の解析と突然変異体分離のための実験系の開発
使用转基因植物开发细胞谱系分析和突变体分离实验系统
  • 批准号:
    05854083
  • 财政年份:
    1993
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
花で発現する遺伝子のトランスジェニック植物を用いた解析
使用转基因植物分析花中表达的基因
  • 批准号:
    04760004
  • 财政年份:
    1992
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
トランスジェニック植物を用いたタンパク質輸送変異株の単離
使用转基因植物分离蛋白质转运突变体
  • 批准号:
    04760071
  • 财政年份:
    1992
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
トランスジェニック植物を用いた転写制御の分子遺伝学的研究
利用转基因植物进行转录调控的分子遗传学研究
  • 批准号:
    03858072
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 0.45万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了