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鳥類摂食関連遺伝子のクローニング及び中枢神経系での制御機構に関する研究

禽类摄食相关基因克隆及中枢神经系统控制机制研究

基本信息

批准号：
11760192
负责人：
大久保武
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760192/
关键词：
ニワトリレプチン受溶体摂食レプチン

项目摘要

ニワトリレプチン受容体に対するモノクローナルを作製し、3種類の抗体を得ることに成功した。この抗体を用いて免疫学的手法によるニワトリレプチン受容体の検出を行い、以下を明らかにした。1)それぞれの抗体を用いたウエスタンブロット解析により、ニワトリレプチン受容体はいずれも約200kDaのタンパクとして検出され、本研究で得られたモノクローナル抗体はレプチン受容体のlong isoformに特異的に反応する事が明らかになった。2)免疫組織化学法により、ニワトリレプチン受容体が脳内に広く分布し、特に視床下部領域に多く存在することを明らかにした。3)ニワトリ脈絡叢ではレプチン受容体mRNA発現が高い事が明らかにされているが、脈絡叢では本抗体と反応する細胞が非常に少なく、ニワトリでも哺乳類で明らかにされているshortisoformに相当するmRNA及びタンパクが存在している可能性が強く示唆された。ニワトリオレキシンcDNAのクローニングと、遺伝子発現について検討を行った。ニワトリオレキシンcDNAは658bpのクローンとして得られた。ニワトリと他の動物種のオレキシン前駆体タンパク質との間の相同性はアミノ酸レベルで約55%であった。ニワトリオレキシンmRNAは視床下部で発現が認められ、特に視索前野での高かった。しかし他の脳部位ではオレキシンmRNA発現は認められず、視床下部領域で特異的に発現しているタンパクであることを明らかにした。哺乳類においてオレキシンは摂食を刺激する事が明らかにされているが、生理的にほぼ絶食状態にある抱卵期のニワトリ視床下部領域のオレキシンmRNA発現は他の時期と変化がないことを明らかにした。

3 kinds of antibodies were successfully produced This antibody is used in immunology. 1) All antibodies used in this study were analyzed for the long isoform of the receptor containing approximately 200kDa protein. 2)Immunohistochemical method is used to detect the distribution of the receptor in the lower part of the body. 3) Choroid plexus is very rare in the expression of receptor mRNA, and the expression of receptor mRNA is very rare in mammalian cells. The detection of cDNA fragments and the detection of cDNA fragments are carried out. The 658bp cDNA sequence was cloned into a cDNA library. About 55% of the animals in the study were found to be genetically identical. The expression of mRNA was detected in the lower part of the retina and in the upper part of the retina. The expression of mRNA in the lower part of the retina is specific to the lower part of the retina Mammals are in the middle of the egg cycle and are in the middle of the physiological cycle.